ANÁLISIS EN FRESCO DE PECES
SANIDAD ACUICOLA 2013
• ANATOMIA EXTERNA E INTERNA DE
PECES OSEOS Y CARTILAGINOSOS
PROTOCOLOS GENERALES DE
DIAGNÓSTICO
• Niveles de actuación
• 1 Información básica y situación epidemiológica
general
• 2 Historia clínica y anamnesis
• 3 Examen "in situ"
• 4 Selección y envío de muestras
• 5 Análisis directo de los peces
• 6 Pruebas “rápidas” directas
• 7 Análisis complementarios
• 8 Diagnóstico e interpretación de los resultados
ANAMNESIS E HISTORIA CLÍNICA
Sobre la instalación y el problema observado:
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
- Características del sistema de cultivo: Jaulas, esteros.
- Localización geográfica.
- Situación dentro de la granja de las unidades afectadas
- Historiales de enfermedades previas
- Especies afectadas: Si tenemos más de una en nuestra instalación
- Rango de tallas afectadas: Tamaño, edad
- Alimentación: Tipo y pautas
- Problema específico que se ha observado: Mortalidad, mal crecimiento, anorexia
- Desde cuándo se observa ese problema
- Día donde ha comenzado el problema: “Síndrome del fin de semana”
- Condiciones ambientales y climatología previa al problema.
- Historial previo de situación de estrés: Movimientos, clasificaciones
- Tratamientos terapéuticos y vacunaciones administradas
- Temperatura: Niveles de riesgo, variaciones bruscas
- Evolución en el tiempo de la mortalidad: Aguda, crónica, intermitente.
Sobre los peces:
• - Respuesta a estímulos: Alimentación, captura
• - Distribución de los peces en el agua: Aislados,
en grupo, en superficie
• - Alteraciones de la natación: Ataxia, errática, en
círculos, “rascado”
• - Alteraciones de la actividad respiratoria: Rápida,
lenta
• - Alteraciones en el aspecto externo
• - Se observa alguna lesión interna
PROCEDIMIENTO DE LA NECROPSIA
• Para la realización de la necropsia
realizaremos las siguientes operaciones:
• 1- Extracción del ojo(s) de su(s) órbita(s) y
examen interno
• 2- Separación del opérculo y exposición de
branquias
• 3- Apertura de la cavidad abdominal
• 4- Apertura y exposición del cerebro
• 5- Observación de la musculatura
1.- Extracción del globo ocular de la
órbita.
Lo observaremos y realizaremos una incisión en
su plano medio para evidenciar su interior.
Nos fijaremos en su forma, la presencia de la
retina y el cristalino, su aspecto y la presencia
de alteraciones como masas anormales de
tejido, sangre, burbujas de aire, opacidad de
córnea o de cristalino, etc.
2.- Separación de opérculo y
observación de branquias.
• Procederemos a cortar el opérculo,
observando también su cara interna.
Procederemos posteriormente a observar
cada uno de los arcos branquiales observando
su color, aspecto y presencia de formaciones
extrañas.
3.- Apertura de la cavidad abdominal
• . Para la apertura de la cavidad abdominal, procederemos
del modo siguiente:
• - Realizaremos una incisión a nivel del ano
(recomendamos con tijeras), dirigiéndonos en unos 45
grados y en dirección craneal hacia la línea lateral del
ejemplar, siguiendo la incisión cranealmente más o
menos a nivel de esta línea lateral hasta llegar a la región
branquial.
• - A continuación, volveremos al ano y realizaremos una
incisión en dirección craneal en la línea media ventral
hasta llegar a la base de las branquias.
• - Realizaremos una tercera incisión uniendo los dos cortes
en la zona branquial y podremos levantar la pared
abdominal.
• Al levantarla, observaremos si hay adherencias y
el aspecto que presenta la cara interna del
abdomen.
• Reconoceremos todos y cada uno de los órganos
internos, su color y aspecto.
• Retiraremos la vejiga natatoria para exponer
mejor el riñón.
• También podemos cortar a nivel de esófago e
intestino posterior y extraer el paquete visceral
para su mejor examen. En este punto
observaremos y anotaremos cualquier lesión que
aparezca.
• Más adelante del capítulo comentaremos las más
importantes que podemos encontrar.
4.- Apertura del cráneo y exposición
del sistema nervioso central.
• Esta técnica es bastante variable según la especie y la
localización del cerebro en ésta.
• La apertura puede iniciarse por una incisión entre las
narinas, para seguir de forma simétrica hacia la zona
superior de cada una de las órbitas oculares.
• Desde esta zona hay que seguir cortando el cráneo en
dirección caudal hasta llegar a la zona de separación
entre cráneo y tronco y unir las dos incisiones
paralelas.
• Posteriormente y haciendo palanca con las pinzas,
levantar cuidadosamente para exponer el encéfalo.
5- Observación de la musculatura
• Es conveniente también levantar la piel de la
región media para observar el aspecto de la
musculatura.
• Una sección transversal de la cola del pez
puede ser también útil para examinar la
musculatura.
• Esta maniobra puede realizarse también al
inicio del proceso de la necropsia.
•
•
•
•
•
1. El corazón bombea sangre hacia las branquias.
2. La sangre es aireada en las branquias.
3. La sangre arterial es dispersada dentro de los capilares, donde tiene lugar la transferencia de
oxígeno y nutrientes al tejido circundante.
4. Los nutrientes del alimento ingerido son absorbidos del intestino y transportados al hígado y
posteriormente dispersados en la sangre a lo lardo de todo el cuerpo.
5. En los riñones la sangre es "purificada" y los productos de desecho son excretados por vía
urinaria.
http://www.fao.org/docrep/v7180s/v7180s04.htm
PRUEBAS DIAGNÓSTICAS RÁPIDAS
• Además de la necropsia, puede hacerse una
observación con lupa binocular de los
• órganos, además de una serie de pruebas
directas que son de realización fácil y rápida
• que son muy útiles en el diagnóstico
patológico en peces, sobre todo en planta.
Estas
• pruebas son las siguientes:
• RASPADOS DE PIEL
• - PREPARACIÓN EN FRESCO DE BRANQUIA
• - "SQUASHES" DE TEJIDO: Cerebro y órganos
internos
• - IMPRONTAS DE BRANQUIA
• - IMPRONTAS DE TEJIDOS
• - PREPARACIONES DE LÍQUIDO BILIAR Y ASCÍTICO
• - PREPARACIONES DE CONTENIDO INTESTINAL
• - PREPARACIONES DE MUSCULATURA
Raspados de piel
• En los raspados de piel podremos detectar la
presencia de ectoparásitos como
• protozoos ciliados, monogenea, bacterias,
hongos etc. El procedimiento es bastante
• simple.
• a/ Raspar la superficie del cuerpo y de las
aletas del pez a examinar usando una hoja de
• bisturí o simplemente mediante un
portaobjetos
Preparaciones en fresco de branquia
• Esta sencilla técnica puede darnos, con un
mínimo de experiencia, bastante información
• acerca del estado y las patologías de un
órgano diana como la branquia.
• a/ Tomar uno de los arcos branquiales y
separar parte de los filamentos del eje del
arco
• hasta que se individualicen los distintos
filamentos.
"Squashes” de tejido
• Esta técnica está especialmente indicada para la
detección de parásitos en los órganos.
• a/ Cortar una sección fina y de pequeño tamaño
del tejido a examinar.
• b/ Cubrir con un cubreobjetos haciendo presión
suave hasta que vemos que el tejido se
• expande e introducir solución salina de la misma
forma que describimos en el raspado
• de piel.
• c/ Observar al microscopio
Improntas de branquia y tejidos
• En estas muestras se pueden observar la presencia de
parásitos y bacterias en los diferentes tejidos.
• A Cortar un trozo pequeño del órgano o branquia a examinar
y con unas pinzas presionar varias veces con este trozo sobre
la superficie de un portaobjetos, hasta que veamos que deja
una huella.
• B Dejar secar al aire o secar a la llama
• C Teñir con las coloraciones habituales. Particularmente
rápidas son las tinciones de Giemsa, Diff-Quick y
especialmente la tinción de GRAM
• D Observación al microscopio. A 1000x aumentos, si existe
una infección bacteriana activa, las bacterias puedes ser
observadas claramente.
• Hay que prestar atención a su morfología, tamaño y
disposición dentro de los órganos.
• Ejemplos de bacterias que se pueden observar:
• GRAM negativa, bacilos muy largos, formaciones en
red: Tenacibaculum maritimum
• GRAM negativa, bacilos muy cortos, tinción bipolar,
agrupados, intracelulares: Photobacterium damselae
sp piscicida.
• GRAM negativa, bacilos largos, forma de coma: Vibrios
Preparaciones de líquido biliar, ascítico y
contenido intestinal
• También el examen del líquido ascítico, bilis o contenido intestinal pueden
aportar información.
• En líquido ascítico podremos observar la presencia de células inflamatorias,
macrófagos con bacterias, bacterias libres, hongos, etc.
• En la bilis y contenido intestinal podremos observar la presencia de parásitos
(sobre todo mixosporidios) y algunos microorganismos (aunque
considerando siempre la posibilidad de contaminación retrógrada de la bilis
procedente del tubo digestivo). Ambos líquidos pueden recogerse mediante
una punción con aguja.
• El líquido ascítico lo trataremos como si fuera para realizar una extensión de
sangre mientras que el líquido biliar lo depositaremos en un portaobjetos,
pondremos un cubreobjetos y lo examinaremos directamente al
microscopio.
• Para el examen del contenido intestinal, cortaremos una sección del intestino
y realizaremos un raspado de la mucosa, depositando este material en un
portaobjetos, lo cubriremos y examinaremos.
Preparaciones de musculatura
• Para los casos de control de parásitos en musculatura
podemos aprovechar la técnica que se utiliza para el control
de Triquinas en el músculo de cerdo.
• Consiste en dos placas de cristal (placas de triquina) que se
unen a presión con unos tornillos. La muestra de
musculatura se introduce entre ambos cristales y se hace
presión con los tornillos para que se extienda bien
• Observando esta placa en la lupa se puede observar la
presencia de quistes de parásitos, nematodos, etc.
• Otra forma más sencilla consiste en cortar un trocito
pequeño de músculo donde sospechemos que están los
parásitos y lo colocaremos entre dos portaobjetos o entre un
porta y un cubreobjetos.
• Examinaremos a condensador cerrado.
Descargar

5 análisis en fresco de peces