II Curso-Taller Nacional de Medicina y Terapia Materno-Fetales
Hospital “Ramón González Coro”, Febrero 2006.
ADN fetal en sangre
materna
Dr. Davide Casagrandi Casanova
[email protected]
www.scog.sld.cu
www.gonzalezcoro.sld.cu
Retos del diagnóstico prenatal
Reducir riesgos de
complicaciones en la gestante.
Diagnóstico en etapas tempranas
del embarazo.
Diagnóstico prenatal no invasivo:
-Células fetales en sangre materna.
-Células fetales en cérvix uterino.
-ADN fetal libre en sangre materna.
ADN fetal libre en sangre
materna
Fuente alternativa de estudio del material genético
fetal sin la necesidad de procederes invasivos
Diagnóstico prenatal
Estudio de afecciones
obstétricas
•En 1997 se identificó por primera vez la presencia de la
secuencia SRY en sangre de gestantes con feto masculino.
Lo et al., The Lancet, 1997.
• Entre el 4% y 6% del ADN fetal libre en la sangre
materna es de origen fetal.
•El análisis del ADN fetal sólo es posible cuando la
secuencia a estudiar está presente en el feto pero ausente
en la madre.
Sangre materna
(plasma, suero)
Aislamiento del ADN libre
P.C.R.
PCR de tiempo real (RT-PCR).
•Estudios recientes emplean la RT-PCR para el estudio
de las secuencias de ADN.
•Permite además la cuantificación del ADN estudiado.
Manuelpillai, Endocrinol, 2001.
Vandesompele, Genome, 2002.
Jones, Mol Hum Rep., 2002.
Casagrandi, Mol Hum Rep., 2003.
Muttukrishna, Mol Hum Rep., 2005.

Se ha detectado ADN fetal a partir de la 5ta. semana.
Honda et al., Cancer, 2001.

La concentración se incrementa con el tiempo de gestación.
Lo et al, Am J Hum Genet, 1998, 1999.

El ADN fetal no es detectable minutos después del parto.
Lo et al, Am J Hum Genet, 1998.
Lo et al, Am J Hum Genet, 1998, 1999.
Determinación del sexo fetal por estudio de
ADN fetal libre en sangre materna



La mayoría de los protocolos estudian la secuencia SRY: la
positividad de la prueba indica el origen fetal del ADN
estudiado.
Indicado fundamentalmente en gestantes con riesgo de
transmitir afecciones monogénicas con patrón recesivo
ligado al cromosoma X.
 Distrofia Muscular de Duchenne.
 Hemofilia.
 Hiperplasia adrenal congénita.
La determinación precoz del sexo permite ofrecer la
interrupción de la gestación en el primer trimestre en
casos de sexo masculino.
Determinación del sexo fetal por estudio de
ADN fetal libre en sangre materna (II)
Procedimiento invasivo innecesario en casos de
sexo femenino.
 Hiperplasia adrenal congénita: se evita la
administración innecesaria de esteroides a los
fetos masculinos.

Rijnders et al., Obstet Ginecol, 2001
Detección de defectos monogénicos
en el ADN fetal libre.
Una vez aislado el ADN libre, es posible estudiar
cualquier secuencia presente en el feto pero
ausente en la madre.
 Mutaciones estudiadas:


Distrofia miotónica (Amicucci et al., Clin Chem, 2000)

Acondroplasia

Fibrosis quística (González-González et al., Prenat Diagn, 2002)

Enf. de Huntington (González-González et al., Prenat Diagn, 2003)
(Saito et al., Tha Lancet, 2000)
ADN fetal y genotipo Rh

Se ha identificado el genotipo Rh fetal a partir de
las 16 semanas de gestación.
Zhong et al., BJOG, 2000.
En casos de fetos Rh- se evitaría la
administración innecesaria de anti-D durante la
gestación.
 El diagnóstico del genotipo fetal mediante el
estudio del ADN se ha convertido en una
práctica frecuente en en varios centros.

ADN fetal y complicaciones obstétricas

Diferentes estudios han demostrado
concentraciones elevadas de ADN fetal libre en
algunas afecciones:




Preeclampsia-Eclampsia.
Parto pretérmino
Restricción del crecimiento fetal
Aneuploidías fetales
Interfase feto-placentaria anormal
ADN fetal libre y aneuploidías fetales.

La concentración de ADN fetal es tres veces
superior en gestantes con fetos con trisomía 21.
Lo et al, Clin Chem, 1999.

Elevado en casos de trisomía 13 y 21, pero no
trisomía 18.
Wataganara et al, Hum Genet, 2003.

ADN fetal como marcador de aneuploidía: Tasa
de detección: 21%.
Farina et al., Clin Chem, 2003.

Añadir la determinación de ADN fetal a otros
marcadores (AFP, E3, hCG, Inhibina) elevaría la
tasa de detección a mas del 85%.
Rijnders et al., 2003.
ADN fetal libre y pre-eclampsia
La concentración de ADN fetal en estas gestantes
es hasta 5 veces mayor.
 Posibles causas:



Placentación anormal.
Disfunción renal (Tai-Wah et al., Clin Chem, 2002.)
ADN total está también aumentado en estas
gestantes.
 ADN total: puede ser estudiado en todas las
gestantes independientemente del sexo fetal.

Farina et al., Prenat Diagn, 2004.
ADN fetal libre y preeclampsia
 Se
han encontrado concentraciones elevadas
en gestantes asintomáticas que
posteriormente desarrollaron preeclampsia.
Zhong et al., Hypertens Pregnancy, 2002.
Farina et al., Prenat Diagn, 2004.
Cooter et al., Am J Obstet Gynecol, 2004.
 La
concentración elevada de ADN fetal libre
puede ser considerada un predictor de PE.
 Elevado también en casos de Síndrome de
HELLP.
Swinkels et al., Clin Chem, 2002.
ADN fetal libre y parto pretérmino.

La determinación del ADN fetal pudiera ayudar
a diferenciar el “falso” parto pretérmino del
“verdadero”.
Leung et al, Lancet, 1998.

Se ha sugerido su determinación como marcador
de parto pretérmino en gestantes de riesgo.
Wataganara et al., Hum Genet, 2003.
Concentración de ADN fetal y algunas
complicaciones obstétricas.
•255 pacientes estudiadas.
•Casos: 70, Controles: 185
•Concentración de SRY mediante RT-PCR (ge/ml)
Aborto
P.Pretérmino
P.E.
D.P.P.N.I.
Placenta Previa
Casos
11,6
44,6
173,2
266,8
167,7
Controles
0
15,9
22,4
4,9
37,0
p__
‹ 0,05
‹ 0,01
‹ 0,05
‹ 0,05
‹ 0,01
Wataganara et al., Hum Genet, 2003.
ADN fetal libre en sangre materna:
conclusiones.
Su aislamiento y estudio ofrecen la posibilidad
de estudiar el material genético fetal sin la
necesidad de procedimientos invasivos.
 Muchas mutaciones del ADN fetal pueden ser
estudiadas por esta vía.
 Su estudio contribuye a esclarecer aspectos de la
fisiopatología de afecciones obstétricas y su
predicción.

D.M.D.
Parto
pretérmino
Preeclampsia
Aneuploidías
ADN fetal en sangre
materna
Predicción
Diagnóstico
ADN fetal en sangre
materna
Dr. Davide Casagrandi Casanova
[email protected]
www.scog.sld.cu
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