UNIVERSIDAD CENTROOCCIDENTAL “LISANDRO ALVARADO”
DECANATO DE CIENCIAS DE LA SALUD
DEPARTAMENTO DE MEDICINA PREVENTIVA Y SOCIAL
SECCION DE MICROBIOLOGÍA
Microbiología Médica I
Tema # 10
Lic. Yudy Aranguren
Enero 2009
BLOQUE 2:
TEMA 10: CONTENIDO:
• Cocos Gram positivos patógenos
• Morfotipos
• Géneros
• Características biológicas
• Diferenciación bioquímica
OBJETIVOS:
10.1.- Diferenciar los diferentes morfotipos de cocos según el exámen directo al
Gram
10.2.- Diferenciar los géneros Staphylococcus, Streptococcus y Enterococcus
según sus características morfológicas, tintoriales y bioquímicas.
10.3.- Describir los pasos para identificación de los diferentes géneros de cocos
Gram positivos
COCOS GRAM POSITIVOS
GÉNEROS DE IMPORTANCIA CLÍNICA
GÉNERO
GÉNERO
GÉNERO
STAPHYLOCOCCUS
STREPTOCOCCUS
ENTEROCOCCUS
Clasificación de Lancefield:
Grupo A
Grupo B
Grupo C
Grupo D
No Enterococcus:
Streptococcus bovis
No tipificables
1984
Estudios
ADN
GÉNERO:
GENERALIDADES:
• Cocos Gram positivo
• Tienen forma redondeada y se presentan en
pares o en grupos en forma de racimos de uva
• Inmóviles
• No forman esporas
• Aerobios y anaerobios facultativos
• Crecen a una temperatura óptima entre 30-37ºC.
Tinción de Gram
• Son catalasa positivo:
• Fáciles de cultivar
Agar Salado Manitol 7%
• Resistente a concentraciones de sal (7%)
• Muy activos metabolicamente: Fermentan azúcares
• Algunos producen pigmentos
-
ESPECIES DE IMPORTANCIA CLINICA
Flora normal, pero potencialmente patógenos en casos de paciente
inmunocomprometidos
Staphylococcus aureus.
Staphylococcus epidermidis
Staphylococcus saprophyticus
CARACTERISTICAS :
• Produce pigmentos (algunas cepas)
• Manitol positivo
• Beta Hemolítico
• Coagulasa positivo
FACTORES DE PATOGENICIDAD:
Proteína A
ESTRUCTURA CELULAR
IgG
Cápsula:
Inhibe la
fagocitosis
Peptidoglicano
Pared celular
Ac. Teicóico:
Adherencia
inespecífica
Adhesinas: Proteínas de superficie que
favorece al anclaje a la célula huésped.
FACTORES DE PATOGENICIDAD:
FACTORES SOLUBLES
ENZIMAS (Invasinas):
Hialuronidasa
Lipasas
Nucleasa
Coagulasa
U
Estafiloquinasa
U
U
U
U
U
U
UU
U
U
U
U
U
U
U
TOXINAS:
Leucocidina
Hemolisinas
Toxina del sindrome del
shock tóxico (TSST-1)
Exfoliativa: sindrome de
la “piel escaldada”
PRODUCTOS CELULARES:
ENZIMAS (Invasinas):
Hialuronidasa
Lipasas
Proteasas
Difusión de la bacteria en los tejidos.
Nucleasa
Coagulasa: Transforma el fibrinógeno en fibrina formando una capa
protectora
EXOTOXINAS:
• Leucocidina: Toxina que produce lisis de polimorfonucleares y de
macrófagos
• Hemolisinas: Cuatro tipos de toxinas (alfa, beta, gamma y delta) lisan
gróbulos rojos, leucocitos y la alfa es también dermonecrótica.
• Exfoliativa: Toxina del sindrome de la “piel
escaldada”
• Toxina del Sindrome del Shock Tóxico (TSST-1): provoca los síntomas
del SST.
ENTEROTOXINAS
• Enterotoxinas: Hay 7 tipos diferentes que producen intoxicación
alimentaria
CARACTERISTICAS :
• Coagulasa negativo
• No hemolíticos
• Crece a 7% NaCl
• No fermenta Manitol
• Sensible a la Novobiocina
FACTORES DE PATOGENICIDAD:
• Presenta un glicocalix de protección
• Adherencia a superficies plásticas y
metálicas
CARACTERISTICAS :
• No contiene proteína A
• Coagulasa negativo
• No hemolítico
• Crece a 7% NaCl
• No fermenta Manitol
• Resistente a la Novobiocina
FACTORES DE PATOGENICIDAD:
• Receptores oligosacáridos específicos de
células de la uretra
Diagnóstico de laboratorio
?
COCOS GRAM POSITIVOS
CATALASA
NEGATIVAS
GÉNERO
Streptococcus
?
REDUCCIÓN DE NITRATOS
POSITIVAS
GÉNERO
Staphylococcus
PRUEBAS BIOQUÍMICA PARA COCOS GRAM POSITIVOS:
COCOS GRAM POSITIVOS
CATALASA
REDUCCIÓN DE NITRATOS
POSITIVAS
• S. aureus
• S. epidermidis
COAGULASA
?
• S. saprophyticus
+
POSITIVA
NEGATIVA
Staphylococcus
aureus
S. epidermidis
S. saprophyticus
-
?
S
E
N
S
I
B
I
L
I
D
A
D
A
L
A
N
O
V
O
B
I
O
C
I
N
A
SENSIBILIDAD A LA
NOVOBIOCINA
SENSIBLE-SIN
CRECIMIENTO
S. epidermidis
RESISTENTECON
CRECIMIENTO
S. saprophyticus
M
O
R
F
O
T
I
P
O
S
CARACTERISTICAS DEL GÉNERO
• Cocos Gram positivos dispuestos en cadenas
o en pares
• Catalasa negativo
• No poseen cápsula : Excepto los Streptococcus pneumoniae
• No son esporulados
• Producen diferentes patrones de hemólisis:
ALFA
BETA
• Aerobios facultativos
GAMMA
• Muy exigentes en cuanto a requerimientos nutritivos
• Fermentan azucares sin producir gas
- +
CLASIFICACIÓN SEGÚN EL TIPO DE HEMÓLISIS
Enterococcus sp
( algunas cepas)
Enterococcus sp
( algunas cepas)
Streptococcus
pneumoniae
Streptococcus
viridans
Grupo D no Enterococcus
(Streptococcus bovis)
Enterococcus sp.
Streptococcus
agalactiae
Streptococcus
pyogenes
CLASIFICACIÓN SEGÚN EL CARBOHIDRATO DE PARED CELULAR
• Clasificación de Rebeca Lancefield (1933)
• Sólo para los beta hemolíticos según el carbohidrato de pared especifico de grupo
Enterococcus sp.
GRUPO D (ac. Teicóico)
GRUPO C y G
Streptococcus
agalactiae
Streptococcus
pyogenes
GRUPO A
GRUPO B
CLASIFICACION SEGÚN SUS DIFERENCIAS FISIOLÓGICAS Y
BIOQUÍMICAS:
Se establecen diferencias entre las 65 especies que componen este género.
• Se utilizan galerías de identificación específicas, como la galería API Strep
• Posee más de 20 pruebas bioquímicas
API 20 Strep
ENFERMEDADES
FACTORES DE PATOGENICIDAD Streptococcus pyogenes
• Diplococos Gram positivos
• Sensibles a la Optoquina
• Poseen cápsula
FACTOR DE VIRULENCIA
Alfa hemolíticos
Factores de patogenicidad:
1.- Cápsula
2.- Enzimas: neuraminidasa: factor de difusión
3.- Toxinas:
• Hemolisina dermatotóxica (neumolisina)
• Leucocidina
CARACTERÍSTICAS:
Streptococcus
agalactiae
• Son beta hemolíticos
• Hidrolisan el hipurato
+
-
• Prueba de CAMP: El estreptococo
del grupo B produce un factor que aumenta
la beta hemólisis de una cepa indicadora de
S. aureus.
S. aureus
S. agalactiae
S.pyogenes
Factores de patogenicidad: Producen enzimas: neuraminidasa, proteasa,
hialuronidasa, y hemolisina
CARACTERÍSTICAS:
• Morfotipo: Diplococos
• Aerobios facultativos
• Hemólisis Gamma (No hemoliticos)
• Poco exigentes para cultivar
• Crecen a 6,5% de NaCl
• 12 Especies: Más comunes: Flora normal intestinal
Enterococcus faecalis 85-90%
Enterococcus faecium 5-10%
• Enfermedades nosocomiales: Resistencia
natural a cefalosporinas y otros antibióticos
FACTORES DE PATOGENICIDAD: citolisinas, hialuronidasas,
beta lactamasa
CLASIFICACIÓN POR PRUEBAS BIOQUÍMICAS:
1.- Hidrólisis de bilis-esculina:
Todos lo Streptococcus del Grupo D son Bilis-esculina
POSITIVO
2- Crecimiento en solución salina al 6,5%
+
-
• Enterococcus (Enterococcus faecalis , Enterococcus faecium) :
CRECEN
• No Enterococcus (Streptococcus bovis): NO CRECEN
-
CARACTERISTICAS:
• Habitan la boca principalmente: Flora normal
• Responsables de las caries
• Hemólisis Alfa
Streptococcus mutans
Streptococcus mitis
Streptococcus salivarium
Streptococcus sanguis
• No son tipificables con las pruebas anteriores
COCOS GRAM POSITIVOS
(Grupos)
Coagulasa
(Cadenas y pares)
Hemolisis
DIAGNOSTICO DE LABORATORIO DE COCOS GRAM
POSITIVOS
MUESTRA: Extendido y frotis para
Tinción de Gram
• Exudado faringeo
• Pus
• Sangre
• LCR
1.- EXAMEN DIRECTO:
Tinción de Gram
Gram: cocos Gram positivos
2.- PRUEBAS BIOQUÍMICA PARA COCOS GRAM POSITIVOS:
COCOS GRAM POSITIVOS
CATALASA
REDUCCIÓN DE NITRATOS
POSITIVAS
NEGATIVAS
• S. aureus
• S. epidermidis
Streptococcus
?
• S. saprophyticus
COAGULASA
SENSIBILIDAD A LA
NOVOBIOCINA
POSITIVA
NEGATIVA
Staphylococcus
aureus
S. epidermidis
S. saprophyticus
?
SENSIBLE-SIN
CRECIMIENTO
S. epidermidis
RESISTENTECON
CRECIMIENTO
S. saprophyticus
Streptococcus
3.- CULTIVO EN AGAR SANGRE:
Agar sangre en 10% Co2:
ALFA
GAMMA
BETA
S. pneumoniae
Sensible a Optoquina
Enterococcus sp
(Grupo-D)
Crece en NaCl 6,5%
S. pyogenes
(Grupo-A)
Sensible a Bacitracina
Grupo Viridans
Reacciones bioquímicas
Grupo-D
No Enterococcus
No crece en NaCl 6,5%
S. agalactiae
(Grupo-B)
Prueba Camp positiva
Grupo Viridans
Reacciones bioquímicas
Enterococcus sp
(Grupo-D)
Crece en NaCl 6,5%
Enterococcus sp
(Grupo-D)
Crece en NaCl 6,5%
AUTOEVALUACIÓN
STAPHYLOCOCCUS
AUREUS
STAPHYLOCOCCUS
EPIDERMIDIS
STAPHYLOCOCCUS
SAPROPHYTICUS
POSITIVO
NEGATIVO
NEGATIVO
Produce pigmentos
SI
NO
NO
Crece a 7% NaCl
SI
SI
SI
SI
NO
NO
-----
SI
NO
PRUEBA BIOQUÍMICA
Coagulasa
Fermenta
Manitol
Sensibilidad a
la Novobiocina
AUTOEVALUACIÓN
TIPO DE HEMÓLISIS
NO HEMOLITICO
Unidos podemos
cambiar al mundo!
Descargar

Diapositiva 1