Preparaciones para Examen con el Microscopio
de Campo Luminoso, Campo Oscuro y Contraste
de Fases.
La obtención de preparaciones adecuadas para el examen
microscópico puede conseguirse mediante dos técnicas
generales, en las que los microorganismos pueden ser
examinados en estado viviente y sin teñir ó después de la
aplicación de colorantes para que resalten con más claridad:
a)
Observación Vital: hace posible la observación
organismos vivos suspendidos en un líquido
de
los
b) La Preparación de frotis ( películas ) desecados, fijos y teñidos
de la muestra.
Observacion Vital
a) Observación Vital: hace posible la observación de los
organismos vivos suspendidos en un líquido
q
Preparaciones Húmedas
q
Preparaciones de Gota pendiente
-La
morfología
de
las
espiroquetas se altera mucho
cuando se desecan y tiñen.
-Para determinar la movilidad
de las baterias.
-Para
determinar
cambios
citológicos durante la división
celular.
q
Tinciones Vitales
-Ofrecen ventajas para la
observación con microscopía
de Campo Oscuro y Contraste
de Fases.
Zona
excavada
Anillo de
Vaselina
Asa de
Inoculación
Gota de Cultivo
bacteriano
Cubreobjetos
Cubreobjetos
Gota de Cultivo
Vaselina
Preparación de
Gota pendiente
Preparación del Frotis: Películas
a) Preparación de frotis ( películas ) desecados, fijos y teñidos de la
muestra.Los pasos a seguir son:
q
Confección del frotis ó película
- Producto líquido
- Cultivo en medio sólido
- Sangre
q
Secado
-Por calor
q
Fijación
q
Coloración
-Con alcohol
metílico, formol
u otros
fijadores
Forma de Realizar una Extensión
de Sangre
Coloración
q
Coloración: es el proceso de teñir artificialmente los
microorganismos con colorantes ó reactivos para facilitar su
estudio microscópico.

Colorante

Grupo Cromóforo-

Grupo Auxócromo

Mordiente-

Soluciones acuosas ó diluídas en alcohol.
Tipos de Colorantes
Los Colorantes pueden ser:
q
Colorantes Naturales.
q
Colorantes Artificiales.
Según el tipo de grupo auxócromo, los colorantes artificiales se dividen en:
A) Acidos . Grupo auxócromo: COOH, SO3H .
B ) Basicos . Grupo auxócromo: NH2 ó N(CH3 )2
C) Neutros
D) Indiferentes
Métodos de Coloración
Los métodos de Coloración son:
a) Coloraciones Simples: fucsina fenicada diluída, azul de metileno, cristal
violeta y safranina.
b) Coloraciones Selectivas ó Estructurales: para cápsulas, gránulos
metacromáticos, esporas, flagelos, etc. en bacterias.
c) Coloraciones diferenciales : Tinción de Gram, Tinción de Ziehl
Neelsen
d)
Coloraciones Panópticas : Tinción de Giemsa, Tinción de Mae-
Grenwald-Giemsa Tinción de Wright.
FIJACIÓN
CRISTAL VIOLETA
TRATAMIENTO CON
IODO
DECOLORACIÓN
CONTRACOLORACIÓN:
SAFRANINA
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