TOMA DE MUESTRAS EN
MICROBIOLOGIA: IMPORTANCIA EN EL
DIAGNÓSTICO DE LAS INFECCIONES
Dra. Montserrat Ruiz García
S. Microbiología
Hospital General Universitario de Elche
Seminario 17 de marzo de 2014
Manual de toma de muestras: Autores
• Sociedad valenciana
Clínica (SVAMC)
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de
Ana Lloret Caballería (Coordinadora)
Manuel Canós Cabedo
Concepción Gimeno Cardona
Damiana González Granda
Pilar López García
Jose Miguel Nogueira Coito
Victoria Ortiz de la Tabla Ducasse
Gloria Royo García
Alberto Yagüe Muñoz
• Consellería de Sanitat
– Francisca Almenar Roig
– Gregorio Gómez Soriano
Microbiología
Diagnóstico de las enfermedades infecciosas
Diagnóstico clínico
Estudio de síntomas y signos clínicos
Diagnóstico microbiologico
Confirmación de la etiología
Diagnóstico microbiológico de las enfermedades
infecciosas
• Demostración de la presencia
del microorganismo
• De sus productos
• De la respuesta inmune
Toma de muestras
“Toda al información
diagnóstica que el
laboratorio de Microbiología
puede proporcionar,
DEPENDE DE LA CALIDAD
DE LA MUESTRA
RECIBIDA”
Toma de muestras en Microbiología
El término calidad incluye
– Muestra apropiada
– Bien recogida
– Transporte adecuado
Toma de muestras en Microbiología
Indicadores de nivel de calidad
(FASE PREANALÍTICA)
– Número de muestras rechazadas
– Muestras contaminadas
– Adecuación de las peticiones a las
muestras
“Es IMPRESCINDIBLE la comunicación entre el personal
sanitario y Microbiología para optimizar la toma de muestras y
aumentar la calidad en la fase preanalítica”
VOLANTE DE PETICIÓN
DATOS DEL PACIENTE
Filiación y datos administrativos
Para evitar errores, es importante
utilizar etiquetas con
CÓDIGO DE BARRAS
y comprobar que la etiqueta del
volante coincide con la de la
muestra
Manual de toma de muestras: objetivo
• El objetivo de este Manual
recomendaciones sobre:
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es
hacer
Muestras más adecuadas
Forma de recogida
Transporte
Conservación
• Señalando:
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El material necesario
La técnica de obtención
El volumen
Número de muestras
Modo de transporte según características de las
muestras o microorganismos a investigar
CRITERIOS DE RECHAZO DE
MUESTRAS
OBJETIVOS
• Evitar el informe de resultados con escaso o
nulo valor, o que provoquen confusión acerca
del diagnóstico y tratamiento del paciente
• Prevenir los problemas de seguridad
biológica que se puedan producir en el
personal del laboratorio
CRITERIOS DE RECHAZO
• Muestra no etiquetada o etiquetada de forma que
pueda llevar a la confusión
• Transporte/almacenamiento inadecuado
• Tiempo excesivo desde la toma de la muestra
• Contenedor inadecuado, roto o no estéril
CRITERIOS DE RECHAZO
• Muestras con contaminación exterior evidente
• Muestras no adecuadas a la petición solicitada
• Cantidad insuficiente
• Muestra previamente manipulada
• Suero en tubo no primario
VOLANTE DE PETICIÓN
DATOS DE LA MUESTRA
• Fecha de obtención
• Naturaleza del producto
• Localización exacta de la toma
• Procedimiento de extracción
• Indicar si se ha aplicado alguna técnica
especial: punción vesical, etc.
VOLANTE DE PETICIÓN
DATOS CLÍNICO-EPIDEMIOLÓGICOS
• Fecha de comienzo de la
enfermedad
• Sospecha diagnóstica
• Estado inmunitario
• Tto. antibiótico, aunque lo
ideal es recoger la muestra
antes de iniciarlo
VOLANTE DE PETICIÓN
ÁREA PARA LA SOLICITUD
• Determinaciones
– CULTIVO: Bacterias
Hongos
Mycobacterias
Anaerobios
Mycoplasmas
– VIRUS
– SEROLOGÍA
• Indicar la sospecha de microorganismos poco
habituales o exigentes
–
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–
–
–
Nocardia
Vibrio cholerae
Actinomyces
Brucella
Legionella
CARACTERISTICAS ESPECIALES
DE LA TOMA DE MUESTRAS EN
MICROBIOLOGIA
OBTENCIÓN DE LA MUESTRA
GENERALIDADES
• Sitio exacto de la lesión
• Aplicar precauciones universales
• Máximas condiciones
contaminaciones
de
asepsia
para
• No poner en contacto con desinfectantes
evitar
OBTENCIÓN DE LA MUESTRA
GENERALIDADES
• Tomar lo antes posible
• Antes del tratamiento antibiótico
• Recoger preferentemente por aspiración en lugar de
hisopos o torundas
• Cantidad adecuada
• Identificación correcta
UROCULTIVOS
•
La muestra adecuada es la primera orina de la mañana recogida en
un contenedor estéril
•
Procedimiento:
– Lavado de genitales
– DESECHAR
LA
PRIMERA
PARTE
DE
LA
MICCIÓN
(FLORA
URETRAL)
– RECOGER LA SEGUNDA PARTE DE LA MICCIÓN
•
La orina de los niños que no controlan los esfínteres debe recogerse
en una bolsa colectora
UROCULTIVOS
•
El volumen mínimo debe estar entre 1 y 10 ml
– Hongos o micobacterias (20 ml)
– Parásitos (> 50 ml)
•
Si no se procesa en una hora, mantener en nevera
•
En catéteres permanentes no recoger del reservorio, hay que
pinchar con una aguja estéril en el catéter
COPROCULTIVOS
• Recoger la parte con moco, pus o sangre
• Cantidad necesaria: 1-2 gramos o 5-10 ml
• Si no se procesa en una hora, mantener en nevera; salvo que
se sospeche Shigella (en este caso, mantener a temperatura
ambiente)
COPROCULTIVOS
• Si es necesario recoger hisopos (neonatos o adultos
debilitados), utilizar medio de transporte
• Solicitar los estudios especiales indicando datos clínicos y/o
epidemiológicos:
– Clostridium difficile, Vibrio spp, Escherichia coli O157:H7
PARÁSITOS EN HECES
• Tres muestras de tres días alternos
• Volumen: 2-4 gramos
• Si la muestra es líquida, hay que procesarla de inmediato y si
es sólida, puede mantenerse a 4ºC
• Indicar datos epidemiológicos (viajes, residencia en el
extranjero, etc)
• OXIUROS: Técnica de Graham (colocación de un celofán
transparente en los bordes del ano y después adherir en un
porta de cristal).
OXIUROS: TÉCNICA DE GRAHAM
EXTRACCIÓN DE HEMOCULTIVOS
HEMOCULTIVOS
1.- Rotular los frascos con las etiquetas del paciente, indicando
si es la 1ª o la 2ª extracción
2.- Desinfección de los tapones de los frascos con un
antiséptico
3.- Seleccionar la vena y desinfectar la zona de venipunción en
círculos excéntricos, primero con etanol 70º(30 segundos),
luego con povidona iodada (1 minuto). Dejar secar un minuto
HEMOCULTIVOS
4.- Utilizar guantes estériles para la extracción de sangre
5.- Inocular en cada frasco: aerobio (color azul) y anaerobio
(color dorado) el volumen adecuado de sangre (8 ml)
comenzando por el frasco anaerobio
6.- Agitar suavemente el frasco y enviarlo inmediatamente al
servicio de Microbiología. En el laboratorio de Microbiología
se deben introducir en la estufa de 37ºC.
FRASCOS DE HEMOCULTIVOS
Tubos y medios especiales para determinaciones serológicas en microbiología
TUBO EDTA LARGO CON SEPARADOR
(NÁCAR)
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Carga Viral o PCR, DNA, RNA…de
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TUBO AMARILLO (SUERO)
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Aspergillus
Borrelia
Brucella
Chagas (Trypanosoma cruzi)
Citomegalovirus (IgG,IgM)
Criptococo
Epstein-Barr (IgG,IgM)
/Monosticon/Paul-Bunnell
Fiebre Q o Coxiella Burnetti
Hepatitis A (IgG),crónica, aguda, B, C,
prevacunación, postvacunación
Herpes simple (IgG,IgM)
Hidatidosis
HIV
HTLV
Leishmania
Legionella
Mycoplasma
Parotiditis (IgG,IgM)
Parvovirus (IgG,IgM)
Proteus o Rickettsias
Rubeola (IgG,IgM)
Salmonella
Sarampión (IgG,IgM)
Sífilis, Lúes o RPR
Toxoplasma (IgG,IgM)
Varicela (IgG,IgM)
Western-blot VIH Y VHC
Hepatitis B
Hepatitis C
VIH
Genotipo Hepatitis C
Resistencias genotípicas ( 2 tubos )
Tropismo VIH (V3)
PCR Citomegalovirus
PCR Enterovirus
PCR Herpesvirus
CHLAMYDIA
TUBO EDTA CORTO (VIOLETA)
•
•
PCR Paludismo, plasmodium o malaria
PCR de Chagas o Trypanosoma cruzi
GRIPE
QUANTIFERON O IGRA’S
(TUBOS PARA DETERMINACIÓN
TUBERCULOSIS)
( rojo, gris, violeta ) sin centrifugar
DETERMINACIONES EN MUESTRAS NO
SEROLOGICAS
DUDAS
Y CONSULTAS
•
(SEROLOGÍA)
Muestras que precisan medio especial
de transporte:
–
–
–
966 61 61 22
•
•
PAPILOMAVIRUS
PCR de Chlamydias
Papilomavirus (HPV)
PCR de Gripe (frotis faríngeo y
nasal)
Heces para PCR de Norovirus
Orina para antígeno de Legionella y
Pneumococo (mínimo 10 ml.)
HECES Y ORINA
TRACTO RESPIRATORIO
• Superior: Exudado faringo-amigdalino
– Utilizar medio de transporte
– Amígdalas y faringe posterior
– No tocar boca, lengua o úvula
• Inferior: Esputo
– Primera hora de la mañana en envase estéril
– Enjuagar la boca con agua
– Expectoración profunda, no saliva
– Si el procesamiento se retrasa más de una hora: nevera
– No almacenar más de un día
TRACTO GENITAL
• Exudado vaginal
– Utilizar torundas con medio de transporte
– No refrigerar. Almacenar a temperatura ambiente o en
estufa a 37ºC
– Si hay sospecha de gonococo, Chlamydias o Mycoplasmas,
obtener un exudado endocervical
• Exudado uretral:
– Utilizar torundas con medio de transporte
– No refrigerar. Almacenar a temperatura ambiente o en
estufa a 37ºC
– Tomar antes de la primera micción de la mañana o
después de una hora de la última micción
PIEL Y TEJIDOS BLANDOS
• Ulceras y heridas
– Lavar previamente con suero fisiológico
– Recoger la muestra con jeringa y aguja. Si no hay
suficiente cantidad, se instila suero fisiológico y se aspira
– Si esto no es posible, recoger en torunda
• Exantemas: Igual que las úlceras y heridas
• Abscesos
– Punción aspiración con jeringa y aguja. Inoculación en
medio para anaerobios
Laboratorio de Microbiología
•
•
Jefe de Sección: Dra. Gloria Royo García
Facultativos:
– Pilar López García
– Victoria Sánchez Hellín
– Montserrat Ruiz García
• Supervisora: Minerva Conca
• Teléfonos: 966 61 61 21 (bacteriología)
966 61 61 22 (serología)
966 61 64 94 (supervisora)
• E-mail: [email protected]
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DIAGNÓSTICO MICROBIOLÓGICO DE LAS NEUMONÍAS