 Chi
Aban Jesica Giselle
 Donde Sima Claudia Alejandra
 Ramos Varguez Alejandra
 Tamayo Cabrera Noemí

En cromatografía, así
como
en
otras
técnicas
de
separación, se utiliza
el análisis químico
para
detectar
y
cuantificar sustancias
presentes (analitos),
en un sistema.
Sirve para identificar
qué elementos, iones
o compuestos hay en
una muestra
Tanto éste, como el
cuantitativo,
se
pueden realizar por
reacciones químicas,
es decir en base a la
reactividad del analito
frente a un reactivo.
La detección puede
ser visual o por medio
de un instrumento
que mida la señal.
Es aplicable en HPLC
, pues permite medir
la altura y el área del
pico y compararla con
la obtenida para una
muestra patrón.
Permiten determinar cuánto hay de uno o
más constituyentes de una muestra.
Es aplicable en cromatografía pues la posición
en que aparecen los picos, permite determinar
el tiempo de retención, el cual será
característico de cada sustancia.
Estos análisis requieren más esfuerzo (tiempo e
insumos) y un trabajo más calificado que los
cualitativos. Un análisis cuantitativo implica un
mayor costo y, por lo tanto, la decisión de que
análisis hacer, depende del valor de la información
cuantitativa.
Muestreo
• Tomar una muestra representativa del sistema que se
analizará.
• Si no se sabe si la muestra contiene al analito, puede
hacerse un análisis cuantitativo previo.
Preparación de la muestra
• Es imprescindible medir el volumen o la masa de la muestra, pues
los resultados siempre se expresan con referencia a la misma.
• En muchos casos, es necesario hacerle un tratamiento a la
muestra.
Determinación de la concentración
• La elección del método más adecuado depende de la
naturaleza de la muestra, de la cantidad de analito
presente y de sus interacciones con otros componentes,
de la precisión que requiere el análisis, del costo y del
tiempo del análisis.
La cromatografía de gases y la cromatografía líquida de alta
resolución (HPLC) son dos técnicas de separación de analitos
que permiten identificar y cuantificar un gran número de
compuestos. Para la cuantificación de compuestos, existen
diversas técnicas como:
a)
b)
c)
La normalización de áreas
El método de patrón externo
El método de patrón interno
Es un medio para
establecer
el
porcentaje de cada
componente en la
muestra. Se calcula
dividiendo el área de
cada
componente
entre el área total y
multiplicando por 100.
La concepto anterior
se resume en la
ecuación:
Es independiente del
volumen de inyección de
muestra y debe cumplirse
que todos los picos
deben estar separados.
Esta ecuación solo se
puede aplicar para una
serie
homóloga
de
compuestos de punto de
ebullición muy parecidos
y
con
similares
respuestas del detector.
Cuando se quiere cuantificar un compuesto presente en una
muestra, empleando este método, los pasos a seguir son:
1.2.-
• Preparar una serie de disoluciones de concentraciones
crecientes, del patrón correspondiente al compuesto a
cuantificar. El intervalo de concentraciones ha de ser similar a
la concentración del analito en la muestra problema.
• Inyectar el mismo volumen de cada una de las disoluciones
patrón en el cromatógrafo, así como del extracto de la
muestra. De esta forma tendremos los distintos
cromatogramas de los patrones (un cromatograma para cada
disolución patrón) y el cromatograma de la muestra.
La
relación de masas conocidas de un patrón de la muestra y de un
estándar deber ser preparadas e inyectadas al cromatógrafo para
luego determinar las relaciones de área. Estas relaciones de áreas
son graficadas en función de la relaciones de masa.
Del
cromatograma se obtienen las áreas de analito y del estándar y
luego con la ecuación de calibración y conociendo la masa del
estándar se puede obtener la masa del analito en la muestra.
La
masa del analito puede calcularse mediante la primera ecuación
y el % de éste presente en la muestra, mediante la segunda
ecuación.
Debe ser resuelto de los otros picos
 Debe eluir cercano al pico de interés
 Debe usarse una concentración similar al pico
de pico de interés. Debe
ser de las mismas características
estructurales.



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

Aldaba, S.; Aramendía, P.; Bonazzola, C.; Lacreu, L.
Química 2, química en acción, Colihue: Argentina,
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401.
Fernández, S. I. Cuantificación de compuestos por
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[En línea] 2003, 3.
Guía
de
cromatografía
http://www.ciens.ucv.ve:8080/generador/sites/LIApregr
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(consultado mayo 2014).
Fernández, S. I. Cuantificación de compuestos por
cromatografía: Método del Patrón Externo.Chem.Rev
[En línea] 2003, 4.
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