Cromatografía
Objetivos:
Separar las especies de interés de otros
componentes en la matriz de la muestra
Características:
•Técnica sencilla y rápida de separación e
identificación.
•Se pueden obtener registros de análisis
(cromatogramas).
•Poco destructivas, aplicables a sustancias
lábiles.
La cromatografía y sus variantes presentan
dos fases, una móvil y otra estacionaria.
Según el dispositivo utilizado para conseguir
el contacto entre la fase móvil y la
estacionaria, se distinguen dos técnicas:
Cromatografía líquido-sólido
(columna)
Otros tipos de cromatografías en columna:
* De reparto
* Sobre geles porosos
Principio de la cromatografía de filtración en gel:
Cromatografía Liquida-Sólida (Capa Fina)
* Esta técnica es una de las más comunes
usadas en el laboratorio.
* Permite:
Determinar el grado de un compuesto.
Comparar muestras.
Realizar el seguimiento de una reacción.
Controlar el contenido de las fracciones
obtenidas en el cromatograma de
columna.
Para realizar una
cromatografía en papel o
placa se procede de la
siguiente manera:
1) Preparar o
cortar, en su
caso, una placa
de tamaño
adecuado.
2) Disolver una
pequeña cantidad
de la muestra y,
mediante un
capilar de vidrio,
pinchar en la parte
inferior de la placa
a cierta distancia
del borde.
3) Introducir la placa
en un recipiente con el
disolvente adecuado.
Dicho recipiente debe
presentar una
atmósfera saturada en
el vapor del disolvente
por lo que se pone
trozo de papel de filtro
en la parte posterior y
disponer de un
sistema de cierre.
4. Cerrar el
recipiente y
dejar que el
líquido
ascienda por
capilaridad.
5) Revelar la
placa para poner
de manifiesto
donde se
encuentran los
puntos .
6) Determinar
las posiciones
relativas de
los puntos
mediante el
cálculo del Rf
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