UNIVERSIDAD AUTONOMA DE CHIAPAS
MAESTRIA EN BIOQUIMICA CLINICA
FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS
CAMPUS IV
MICROSCOPIA
OPTICA
Presenta:
Q.F.B Karla Alejandra López
Guzmán
La microscopía es la
técnica
de
producir
imágenes
visibles
de
estructuras o detalles
demasiado
pequeños
para ser percibidos a
simple vista
El nombre deriva
etimológicamente de dos
raíces griegas: mikrós, que
significa pequeño y skopéoo,
que significa observar
Los
microscopios
pertenecen
a
dos
clases,
el
de
luz
(óptico)
y
el
electrónico, según el
principio en que se
base la amplificación

Diferencias
Un microscopio óptico es un microscopio
basado en lentes ópticos. También se le
conoce como microscopio de luz, (que
utiliza luz o "fotones") o microscopio de
campo claro.
entre
electrónico y el óptico:
el
microscopio
La potencia amplificadora de un microscopio óptico está
limitada por la longitud de onda de la luz visible.
El microscopio electrónico utiliza electrones para
iluminar un objeto. Dado que los electrones tienen una
longitud de onda mucho menor que la de la luz pueden
mostrar estructuras mucho más pequeñas
El microscopio fotónico
compuesto esta
integrado por dos tipos
de componentes:
COMPONENTES MECÁNICOS:
Son aquellos que sirven de
sostén, movimiento y sujeción
de los sistemas ópticos y de
iluminación así como de los
objetos que se van a
observar.

COMPONENTES ÓPTICOS:
Son los objetivos, los
oculares, el condensador
y los prismas. Los tres
primeros están
constituidos por sistemas
de lentes positivos y
negativos.
Condensador: Es el
componente óptico
que tiene como
función principal
concentrar y regular
los rayos luminosos
que provienen de la
fuente luminosa

La imagen que
forman los objetivos
es aumentada de
tamaño, invertida y
real.
Objetivos. Se consideran los elementos
más importantes en la formación de la
imagen microscópica, ya que establecen
la calidad de la imagen en cuanto a su
nitidez y la capacidad que tiene para
captar los detalles de la misma (poder de
resolución). Están constituidos también por
un juego de lentes, en este caso,
convergente y divergente, para eliminar,
en la medida de lo posible, una serie de
aberraciones que afectarían la calidad
de las imágenes formada
Microscopio de transparencia o de
campo claro. Este microscopio se
caracteriza porque emplea luz
natural o luz artificial como energía
luminosa para formar las imágenes
del objeto que se observa
La muestra que se va a observar debe ser
teñida con algún colorante que permita
hacerla destacar sobre el fondo claro o
brillante que proviene de la fuente
luminosa
Imagen obtenida con
células teñidas con azul
de toluidina, 400x
El microscopio de campo oscuro utiliza un
haz enfocado de luz muy intensa en forma
de un cono hueco concentrado sobre el
espécimen. El objeto iluminado dispersa la
luz y se hace así visible contra el fondo
oscuro que tiene detrás, como las partículas
de polvo iluminadas por un rayo de sol que
se cuela en una habitación cerrada.
Dado que la imagen solo se forma con las
luz difractada, siempre más débil que la luz
directa deben formarse fuentes lumínicas
muy intensas, lo que no siempre es fácil
sobre todo cuando los objetos son vivos y,
por consiguiente, sensibles a fuertes
iluminaciones
El microscopio de campo oscuro se
emplea para ver células vivas
(protozoarios, bacterias, células
descamadas, etc.) en las cuales no se han
aplicado sustancias fijadoras ni colorantes.
También se observan partículas de un
tamaño inferior a los 0.2 de micrómetro;
esto se debe a que los rayos de luz
oblicuos que inciden en ellas forman un
halo luminoso brillante alrededor de las
mismas
MICROSCOPIO DE CONTRASTE DE FASES.
Es el microscopio fotónico más utilizado para
observar objetos o estructuras transparentes sin
teñir. facilita la observación de células vivas para
distinguir y analizar sus componentes morfológicos y
ciertas funciones que ellas puedan desarrollar
permite observar
células sin colorear y
resulta especialmente
útil para células vivas.
Este aprovecha las
pequeñas diferencias
de los índices de
refracción en las
distintas muestra de
tejidos de una célula
Las partes oscuras de la imagen
corresponden a las porciones
densas del espécimen; las
partes claras de la imagen
corresponden
a
porciones
menos densas.
Una modificación del microscopio de contraste de fases es el microscopio
de contraste diferencial o de interferencia (que utiliza el sistema óptico de
Nomarski) en el cual un único rayo de luz atraviesa la muestra y el
objetivo, pero luego se divide en dos rayos que interfieren entre sí por
medio de un prisma. Mediante accesorios ópticos especiales se obtiene
una imagen con un efecto de relieve característico. Utiliza dos rayos de luz
polarizada y las imágenes combinadas aparecen como si la célula
estuviera proyectando sombras hacia un lado., es muy utilizado en los
tratamientos de fertilización in-vitro actuales.
La microscopía de
fluorescencia.
Aporta otra solución mucho más directa.
Mediante el empleo de fuentes de iluminación
de gran intensidad y sincrónicas, de un juego de
diafragmas y de un sistema de captación de
imagen electrónico, permite la obtención de
imágenes de finas secciones ópticas. A partir de
series de secciones ópticas de estos tipos
obtenidos a diferentes profundidades, archivados
en un ordenador, resulta posible reconstruir una
imagen tridimensional
En este tipo de microscopia una
sustancia natural en las células
o un colorante fluorescente
aplicado al corte es estimulado
por un haz de luz, emitiendo
parte de la energía absorbida
como rayas luminosas: esto se
conoce como fluorescencia. La
luz fluorescente de mayor
longitud de onda se observa
como si viniera directamente
del colorante
Siendo escasas las moléculas
autofluorecentes, su aplicación
más difundida es para revelar
una fluorescencia agregada,
como en la detección de
antígenos o anticuerpos. Con
sustancias
llamadas
como
fluorocromos.
La microscopia de
fluorescencia , ha permitido
avanzar en los procesos de
investigación de procesos
fisiológicos celulares
GRACIAS
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presentación microscopia optica