…CONOCIENDO EL
MICROSCOPIO
Historia del Microscopio
1590.
Primer microscopio compuesto
fue construido por los
holandeses H. Jansen y
Z. Jansen
1611
Kepler sugirió la manera de construir
un microscopio compuesto
1655 Hooke utilizó un
microscopio
compuesto para
describir unas
pequeñas celdillas
en los cortes de
corcho a las que
denominó "células".
1674 Leeuwenhoek informó sobre
su descubrimiento de protozoos.
Nueve años más tarde observó
por primera vez bacterias
1833 Brown publicó sus observaciones microscópicas de
las orquídeas, y describió claramente el núcleo
celular.
1838 Schleiden y Schwann propusieron la teoría celular,
afirmando que la célula nucleada es la unidad
estructural y funcional de las plantas y los animales.
1857 Kolliker describió las mitocondrias de las células
musculares.
1879 Flemming describió con gran claridad el
comportamiento de los cromosomas
durante la mitosis de las células animales
1882 Koch utilizó colorantes de anilina para teñir
microorganismos e identificó las bacterias que causan
la tuberculosis y el cólera.
1908 Köhler desarrolla el microscopio de fluorescencia
1930 Lebedeff diseñó y construyó el primer microscopio de
contraste interferencial.
1931 Ruska y Knoll construyen el primer microscopio
electrónico
1932 Zernicke inventó el microscopio de contraste de
fases. Se observan por primera vez células vivas no
teñidas en detalle.
1934 Von Ardenne construye el primer microscopio
electrónico de barrido
1981 Allen e Inoué perfeccionaron la microscopía óptica de
contraste video-amplificada.
Alberts, Bruce, Biología Molecular de la
Célula (2da. Edición, Ediciones Omega,
Barcelona, 1994)
Microscopios
Estereoscópicos
o lupas
M. Óptico,
fotónico
o corriente
Compuestos
M. contraste
de fases
M. de
fluorescencia
M. E. de transmisión
M. Electrónico
M. E. de barrido
Microscopio estereoscópico o lupa
• Aparato simple que forma una imagen
aumentada. (app. 540 veces)
• Mayor poder de penetración que el
microscopio de luz
Microscopios Compuestos
• Poseen dos lentes que producen una
imagen ampliada, vertical e invertida al
objeto
Microscopio óptico, fotónico o
corriente
• Es de campo claro ya que la luz
que llega perpendicular a la
preparación, la atraviesa y
penetra el sistema óptico,
permitiendo un campo bien
Célula de Pisum,
iluminado.
coloración: safranina-fast-greenTraqueidas del leño de Pinus
El microscopio óptico tiene un
límite resolución de cerca de 200
nm (0.2 µm). Las células
observadas bajo el microscopio
óptico pueden estar vivas o fijadas
y teñidas.
Microscopio de contraste de fases
• Se usa
principalmente para
aumentar el contraste
entre las partes claras
y oscuras de las
células sin colorear.
Es ideal para
espécimenes
delgados, o células
aisladas
Phase contrast image of cultured
epithelial cells using a 20X objective
Microscopio de fluorescencia
• Usa luz U.V. con una longitud de
onda (100 y 380 nm) menor que
la luz blanca (380 a 750 nm).
Esta luz excita ciertas sustancias
que emiten radiaciones (mayor a
380 nm) que las hace visibles.
• Algunos materiales no requieren
colorantes pues tienen
fluorescencia propia y otros
deben ser teñidos con colorante
fluorescente, es estimulado por
un haz de luz, emitiendo parte de
la energía absorbida como rayos
luminosos.
Células epiteliales , triple coloración: núcleo
(azul), microtubulos (verdes), actina (rejo).
Microscopio electrónico
• Posee mejor poder de resolución y
aumento que los microscopios antes
mencionados.
• Permite visualizar la ultraestructura celular
El microscopio electrónico de
transmisión (MET) tiene un limite de
resolución de cerca de 2 nm. Un MET
permite observar profundidades después
de haber sido fijadas y teñidas con iones
de metales pesados. Los electrones son
dispersados cuando pasan a través de
una fina sección del espécimen, y luego
detectados y proyectados hacia una
imagen sobre una pantalla fluorescente.
El microscopio electrónico de barrido
(MEB) tiene un limite de 2nm. El MEB
permite observar la superficies de las
muestras, después de haber sido
fijadas y teñidas con iones de metales
pesados. Con esta técnica los
electrones son reflectados sobre la
superficie del espécimen.
Observa detenidamente las siguientes fotos tomadas mediante microscopio
(micrografías) y señala qué tipo de microscopio se utilizó en cada caso. Justifica
a. Ameba, organismo
formado por una sola
célula (unicelular), que
mide cerca de 50
micrones
b. Células del interior de una
trompa de Falopio. Cada uno
de los “pelitos” que se ven
mide 10 micrones de largo y
se llaman cilios
c. Espermio
acercándose a un
óvulo. El óvulo
humano es una
célula que mide
poco más de 100
micrones
d. Núcleo de una
célula animal, de
alrededor de 5
micrones de
diámetro
e. Corte transversal de una
hoja
f. Poros de salida de
glándulas gástricas.
Por una de ellas sale
un chorro de jugo
gástrico
g. Corteza cerebral
humana, que tiene un
espesor de unos pocos
milímetros
h. Glóbulo blanco
deformado al atravesar
por un capilar
sanguíneo. Este capilar
tiene un diámetro de
unos 10 micrones
i. Capilar sanguíneo
cortado
transversalmente,
por el que asoma un
glóbulo rojo, célula
que mide 7 micrones
de diámetro
Percepción 3D
Tanto en la microscopía óptica como eléctrica de transmisión, las muestras
se observan en “cortes”, vale decir, láminas delgadas que faciliten el paso de la luz o
los electrones según corresponda. Por este motivo, para poder observar
microscópicamente, es necesario tener una buena percepción tridimensional. Hay
que saber proyectar la estructura 3D desde una imagen que siempre será
bidimensional, porque se trata de la foto de una lámina.
Para ensayar tal habilidad, se propone el siguiente ejercicio. Se trata de interpretar
de qué manera se hizo el corte para lograr las siguientes imágenes de objetos
comunes.
Objeto
Peineta
Cuchara
Lápiz
Peineta
Tomate
Dado
“Foto”
Forma en que se hizo el
corte
(dibuja o explica)
Preparación tal como
se ve al microscopio
óptico. Se trata de las
células de la cubierta
interna del intestino
Mal esquema de una preparación
microscópica
Preparación tal como
se ve al microscopio
óptico. Se trata de las
células de la cubierta
interna del intestino
Esquema que no es esquema. Mas
bien es un “retrato” de la preparación
Preparación tal como
se ve al microscopio
óptico. Se trata de las
células de la cubierta
interna del intestino
Buen esquema de una preparación
microscópica
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