Cocos Gram Negativo
Neisseria spp
M. Paz
Microbiología UMG-2014
Familia Neisseriaceae
 Géneros

Neisseria
• Patógenos humanos




Kingella
Eikenella
Simonsiella
Alysiella
Género Neisseria
 Único
reservorio: ser humano
 Dos especies patógenas

N. gonorrhoeae
• Gonorrea

N. meningitidis
• Meningitis epidémica/meningitis meningocóccica
 Muchas
especies no patógenas habitantes
del tracto respiratorio.
Género Neisseria
 Neisser

(1879)
Describió al agente causal de la gonorrea
 Leistikow

& Loeffler (1882)
Cultivo por primera vez
 Weichselbaum



(1887)
aisló a N. meningitidis de LCR de un paciente
con meningitis purulenta
endémica, epidémica y meningococcemia
estado de portador
Género Neisseria: Morfología






Aerobios
Cocos Gram Negativo
No móviles
Crecen en parejas
No formadores de esporas
Los cocos individuales son pequeños (0.8 x 0.6
µm)


Tienen forma de riñón (lados planos adyacentes)
Citoplasma y pared celular son similares entre
las dos especies y similitud de ADN de 70%
Género Neisseria: Morfología





Pared celular: tiene una capa densa y una
membrana externa
Meningococos: tienen cápsula de polisacáridos
y pocos plásmidos
Gonococos: no cápsula y sí contienen
plásmidos
Ambas especies forman colonias convexas,
brillantes y mucoides de 1-5 mm.
Medios de crecimiento: agar chocolate y CO2 al
5%
Características de cultivo

Crecen mejor en condiciones aeróbicas.
 La mayoría oxidan carbohidratos, producen
ácido pero no gas.
 Producen oxidasa.
 Susceptibles a ácidos grasos y a metales traza
contenidos en la peptona y en el agar (se
contrarresta con sangre, suero, almidón o
carbón)

El agar “chocolate” es más adecuado
Características de cultivo
Baja Resistencia a condiciones físicas y químicas
 Sufren autólisis
 Susceptibles a desecación

 Oxidasa

(+)
Oxidan rápidamente DPD o TPD (dimetil o
tetrametil para fenilendiamina)
• Produce un color de rosado a negro en las colonias
Género Neisseria: Metabolismo
Organismo
Crece en agar
sin sangre
Crece a
22°C
Oxida
Glucosa
Oxida
Maltosa
Oxida
Sacarosa
N.
meningitidis
-
-
+
+
-
N.
gonorrhoeae
-
-
+
-
-
Neisseria meningitidis
Neisseria meningitidis
 Usualmente
habita en la nasofaringe sin
causar síntomas (microbiota transitoria)
 Desde la nasofaringe acceden a la sangre
y causan meningococcemia
 Complicación: meningitis
 Meningococcemia grave: fulminante,
fiebre elevada y exantema hemorrágico,
CID y colapso circulatorio (WaterhouseFriderichsen)
Patogenicidad y virulencia de
N. meningitidis
• Mediada por los pili
• Colonización específica de receptor de las células
no ciliadas de la nasofaringe
• Cápsula antifagocítica de polisacárido que le
permite diseminarse en ausencia de inmunidad
específica.
• Efectos tóxicos mediados por hiperproducción
de lipooligosacárido
 Serogrupos A, B, C, Y, W135 responsables de 90% de
todas las infecciones
Patogenicidad y virulencia
Receptores para las fimbrias bacterianas (gangliósido GD1)
sobre las células columnares epiteliales no-ciliadas en la
nasofaringe del hospedero.
Los m.o. son internalizados en vacuolas fagocíticas,
evitando la muerte intracelular.
Replicación intracelular y migración al espacio subepitelial
donde libera fragmentos de membrana.
Hiperproducción de endotoxina (lípido A) y se disemina
al ambiente circundante (espacios subepiteliales, torrente
sanguíneo): causa la mayoría de manifestaciones clínicas
de daño vascular: daño endotelial, vasculitis, trombosis,
CID.
Epidemiología

Diseminación persona-persona vía aerosolización de
secreciones respiratorias

Más alta incidencia en niños menores de 5 años,
personas institucionalizadas y pacientes
inmunodeficientes

Meningitis y meningococcemia: serogrupos B y C

Neumonía: serogrupos Y y W135

Infecciones en países subdesarrollados: serogrupo A
•
Mayor incidencia en las épocas frías y secas del año en
todo el mundo (Se presenta en ondas)
Diagnóstico
• Muestras: LCR, sangre y aspirados petequiales
• Frote de Gram: difícil cuando hay pocos m.o
(centrifugar y obtener sedimento para la tinción)
• Cultivo: en agar chocolate o TM en jarra con
candela a 37C
• Identificación: Oxidasa y pruebas de oxidación
de carbohidratos
Cultivo

Medio selectivo de Thayer Martin
• Agar chocolate con Vancomicina (inhibe a Gram +),
Colistina (inhibe a Gram -), Nistatina (inhibe hongos)
y Trimetoprim (inhibe a Proteus spp que ocasiona
swarming)
• Las colonias requieren 48-72 horas para crecer.

Medio alternativo: Agar Lewis Martin agar
(similar al TM, pero usa anisomicina en lugar
de nistatina, para inhibir mejor a Candida
albicans).
Cultivo en jarra con candela
Cultivo de N. meningitidis
Enfermedades asociadas con
Neisseria meningitidis
Después de la diseminación de
organismos virulentos de la nasofaringe:
 Meningitis
 Septicemia (meningococcemia) con o sin
meningitis
 Meningoencefalitis
 Neumonia
 Artritis
 Uretritis
Infecciones por MGC
 Síntomas:
fiebre alta, escalofríos, dolor
muscular y rash petequial (típico de
infecciones por MGC)
 Enfermedad puede ser crónica, moderada
o fulminante.


Tipo fulminante: Síndrome de W-F con CID,
hemorragia dentro de la piel, glándulas
adrenales y otros órganos.
Muerte rápida por la toxemia generalizada y
el shock.
Rash Petequial
Síndrome de WaterhouseFriderichsen
Prevención y Tratamiento
•
Inmunidad pasiva por lactancia
•
Droga de elección: penicilina
•
Drogas alternativas: cloranfenicol, ceftriaxona y
cefotaxima.
•
Quimioprofilaxia para contactos: rifampicina o
sulfadiazina
•
Inmunoprofilaxia: vacuna (no efectiva para el
serogrupo B)
Prevención y Tratamiento
•
Vacunas de polisacárido conjugado para niños
menores de 2 años (18 meses).
•
Serogrupos A, C, Y y W-135
• No se muy inmunogénica ni confiere inmunidad
prolongada

Vacuna conjugada con el toxoide diftérico
• Autorizada para 11-55 años
Neisseria gonorrhoeae
Neisseria gonorrhoeae
 Único
hospedero natural: humano
 Portador asintomático es el mayor
reservorio.
 Edad más afectada: 15-24 años
 Patogenia: gonorrea


Uretritis
Cervicitis
Generalidades de Neisseria
gonorrhoeae
 Fácilmente transmitido por contacto sexual
 Diplococos Gram-negativo achatados por el lado de
unión.
 Fastidiosos, capnofílicos y susceptibles a temperaturas
frías, a la desecación y a ácidos grasos.
• Requiere medios pre-calentados complejos
• El medio debe llevar almidón soluble para neutralizar la
toxicidad de los ácidos grasos
• Crece mejor en atmósfera húmeda suplementada con CO2
 Produce ácido de la oxicación de glucosa, pero no de
otros azúcares.
Diagnóstico, tratamiento y
prevención








Tinción de Gram es precisa en muestras masculinas.
Cultivo: diagnóstico definitivo
Biología molecular
Tratamiento: Cefixima, Ceftriaxona, Ciprofloxacina y
ofloxacina en casos no complicados. Penicilina debe
evitarse porque ya se presenta mucha resistencia.
Doxiciclina y Azitromicina en casos complicados con
Chlamydia sp.
Profilaxia de conjuntivitis neonatal: nitrato de plata 1%
Prevención: educación (ETS)
NO HAY VACUNA
Crecimiento de GC enMTM
Oxidasa positivo
Prueba de Oxidasa en placa
Prueba de Oxidasa en papel
Identificación Bioquímica

Para diferenciar entre las especies de
Neisseria y B. catarrhalis.
• Pruebas de utilización de carbohidratos.
• Oxidación de Carbohidratos

Se usa un Agar Cistina-Triptosa (CTA) con
azúcares. Requiere una inoculación grande e
incubación sin CO2 y observación por 24-72
horas.
• Resultados: GC: + para glucosa solamente
Azúcares en CTA
Epidemiología de la Gonorrea
 Serio subregistro
 Diferencia epidemiológica entre hombres y
mujeres
 Mayor reservorio: portador sintomático
 Transmisión sexual
 No hay inmunidad protectora para la reinfección
(en parte por la diversidad antigénica de las
cepas)
 Mayor riesgo de enfermedad diseminada en
pacientes inmunocomprometidos.
Mujeres
Hombres
Riesgo post-exposición (1 contacto) es
de 50%
Riesgo post-exposición (1 contacto) es
de 20%
Frecuentemente asintomática y sin dx
Mayoría: sintomático (95%)
Principal reservorio es la portadora
asintomática
Principal reservorio es la portadora
asintomática
Infección genital primariamente en el
cervix, pero también son colonizados la
vagina, la uretra y el recto.
Infección genital restringida a la uretra
con descarga purulenta y disuria
Infecciones ascendentes en 10-20%:
salpingitis, abscesos tubo-ováricos,
enfermedad inflamatoria pélvica,
infertilidad por infección crónica.
Complicaciones raras: epididimitis,
prostatitis y abscesos periuretrales.
Infecciones diseminadas más comunes:
septicemia, infección de la piel y
articulaciones (1-3%)
Infecciones diseminadas muy raras
Puede infectar al infante durante el
parto: conjuntivitis, oftalmia neonatorum
Más común en hombres
homosexuales/bisexuales que en la
población heterosexual
Patogenia de Neisseria gonorrhoeae
 Bacterias fimbriadas se adhieren al epitelio de la
membrana mucosa intacta
 N. gonorrhoeae tiene capacidad de invadir
membranas intactas o piel con abrasiones.
 Adherencia al epitelio mucoso
 Penetración y multiplicación antes de pasar a través de
las células epiteliales de la mucosa
 Establecimiento de la infección en la capa subepitelial
 Sitios más comunes de inoculación:
• Cervix (cervicitis) o vagina en la mujer
• Uretra (uretritis) o pene en el hombre
Factores de virulencia asociados a
Neisseria gonorrhoeae
Gonorrea
Ophthalmia neonatorum
Significancia clínica del GC
• Infecciones complicadas


Ocurren más frecuentemente en mujeres
Diseminación del cérvix a las trompas de
falopio
• Endometritis
• Salpingitis
• Peritonitis (EIP)
• Ocurre en 10-20% de mujeres infectadas
• Síntomas: dolor abdominal bajo, flujo
cervical y vaginal anormal, útero blando.
• Puede resultar en infertilidad o en
embarazo ectópico.
Salpingitis
GONOCOCCEMIA
 Presencia
de N. gonorrhoeae en el
torrente sanguíneo que puede llevar al
desarrollo de una infección gonocóccica
diseminada (IGD).
 Ocurre en aprox 0.5-3% de pacientes con
gonorrea.
Manifestaciones clínicas
 Cuadro

bifásico:
Fase temprana
• Tenosinovitis
• Artralgias
• Dermatitis

Fase localizada
• Artritis séptica
 Complicaciones:
osteomielitis, meningitis,
endocarditis, síndrome de dificultad
respiratoria y shock séptico fatal
Pacientes a riesgo
 Mujeres
embarazadas o menstruando
 Personas con inmunodeficiencias



Deficiencia de complemento
Enfermedad por VIH
Lupus Eritematoso Sistémico
Fisiopatología
 Diseminación
del gonococo desde un sitio
primario como el endocérvix, la uretra, la
faringe o el recto hacia la sangre y luego a
un órgano final.
 Usualmente son infectados múltiples sitios

Articulaciones y piel
 Depende
de cambios fisiológicos del
paciente y de factores de virulencia del
GC
Cambios fisiológicos
 Cambios



Menstruación
Embarazo
Puerperio
 Edad


en el pH vaginal
con más incidencia:
Hombres con 20-24 años
Mujeres de 15-19 años
Factores de virulencia
 Pili
y fimbrias: adherencia a las
superficies mucosas
 Evasión de la fagocitosis
 Proteínas de membrana externa (P1, P2 y
P3)
 Lipooligosacárido (LOS): resistencia a la
bacteriólisis
 Cepas productoras de Proteasas de IgA
ayudan a la supervivencia del GC en las
mucosas
Diagnóstico diferencial
 Manifestaciones
cutáneas de hepatitis
 Meningococcecia
 Artritis reactiva
 Artritis psoriática
 Sífilis
 Dermatitis (acanthosis nigricans)
Diagnóstico
 Recuento

de leucocitos: Leucocitosis
10,000-15,000/µL
 VSE:
medianamente elevada
 Cultivo positivo: usualmente de sitios de
mucosas: faringe, uretra, cérvix o recto.
 Los hemocultivos son negativos en su
mayoría (sólo 20-30% son +)
 Métodos moleculares (PCR)
Tratamiento
 Hospitalización
para tratamiento inicial
 Antibióticos intravenosos por 24-48 horas
 Luego se cambia a terapia oral.
 Terapia empírica inicial: cefalosporinas de
tercera generación –ceftriaxona Cambio a Penicilina G o ampicilina si es
susceptible.
Moraxella catarrhalis
Moraxella catarrhalis






Diplococo gram-negativo
Aerobio y oxidasa positivo
Ha sido objeto tanto de cambios en la nomenclatura y
clasificación taxonómica como de su consideración de
comensal o patógeno.
Actualmente, es aceptado como el tercer patógeno más
importante en el tracto respiratorio humano después de
Streptococcus pneumoniae y Haemophilus influenzae.
En los últimos 20 años, esta bacteria ha emergido como
un importante patógeno causante de infecciones en el
tracto respiratorio superior de niños y ancianos, e
infecciones del tracto respiratorio inferior en adultos con
enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC).
Aproximadamente, el 90% de las cepas son productoras
de ß-lactamasas.
Moraxella catarrhalis

Micrococcus catarrhalis
 Neisseria catarrhalis
 En 1970, basándose en la diferencia en el
contenido de ácidos grasos y mediante estudios
de hibridación de ADN se demostró la escasa
homología que existía entre N. catarrhalis y las
llamadas "verdaderas" especies de Neisseria,
estando, más cercana al género Acinetobacter.
Así pues, fue reclasificada y transferida al
género Moraxella
Moraxella catarrhalis

Actualmente, el género Moraxella engloba cocos
y bacilos cortos relacionados genéticamente
 Bovre propone su división en dos subgéneros:
Branhamella, que englobaría los cocos y
Moraxella para los bacilos cortos.
 Algunos autores prefieren el nombre de
Branhamella catarrhalis


Las otras especies de Moraxella son bacilos cortos,
mientras que M. catarrhalis son diplococos
M. catarrhalis es un importante patógeno del tracto
respiratorio humano, mientras que las especies de
Moraxella rara vez causan infección en humanos.
Patogenia de Moraxella catarrhalis
 En




Otitis media
Sinusitis
Bacteremia
Meningitis
 En



niños:
adultos:
exacerbaciones en pacientes con EPOC
neumonía en ancianos
infecciones nosocomiales.
Factores de virulencia de Moraxella
catarrhalis
 LOS
(Lípido A)
 Peptidoglucano
 Proteínas de la membrana externa
 Fimbrias
 Cápsula
 Proteínas reguladores del hierro
 Resistencia al complemento
Diagnóstico de Moraxella
catarrhalis




Muestras clínicas: Gram, Cultivo y pruebas bioquímicas
Crece en medios comunes, como agar sangre y agar
chocolate,
Colonias redondas, opacas, convexas y de color gris.
Los criterios más usados para su identificación son los
siguientes:






Ausencia de pigmentación en agar sangre (no hemolítica).
Producción de oxidasa y catalasa.
Producción de DNAasa.
Hidrólisis de la tributirina.
Ausencia de producción de ácido a partir de glucosa, maltosa,
sacarosa y fructosa.
Reducción de nitratos y nitritos.
Tratamiento de Moraxella
catarrhalis
 Las
cepas de M. catarrhalis son
uniformemente sensibles a las quinolonas,
amoxicilina-clavulánico, cefalosporinas,
ticarcilina, piperacilina, macrólidos,
cloranfenicol y aminoglucósidos.
 Se han comunicado casos aislados de
cepas resistentes a las tetraciclinas,
eritromicina, fluoroquinolonas, macrólidos,
piperacilina y a algunas cefalosporinas
Descargar

Cocos Gram Negativo Neisseria spp & Moraxella sp