Facultad de Bacteriología y Laboratorio Clínico
Universidad de Santander UDES
BRUCELOSIS
Enfermedad zoonótica, intracelular, afecta a diferentes
especies de animales domésticos y silvestres.
Barreras en comercialización de los
animales y sus productos.
Altera desarrollo socioeconómico del
sector rural más vulnerable.
Distribución mundial. Incidencia variable de unas áreas a
otras. Algunos países del centro y del norte de Europa han
conseguido su erradicación. En Sudamérica
y países mediterráneos, (europeos y africanos)
la Enf. continúa siendo frecuente.
División BXII. Proteobacteria
Clase I Alphaproteobacteria
Orden I Rhodospirillales
Familia II Acetobacteraceae
Género I Acetobacter
Género IX Gluconobacter
Orden II Rickettsiales
Familia I Rickettsiaceae
Género I Rickettsia
Orden VI Rhizobiales
Familia I Rhizobiaceae
Género I Rhizobium
Género II Agrobacterium
Familia III Brucellaceae
Género I Brucella
POBLACIÒN SUSCEPTIBLE
C
Consumidores de leche cruda o de subproductos
lácteos o cárnicos contaminados con la Brucella.
Veterinarios, manejadores
de ganado, vacunadores,
operarios en matadero.
Microbiólogos, Bacteriólogos,
Auxiliares de laboratorio
Población
infantil rural
y urbana
marginal
AGENTE CAUSAL Brucella spp.
Gram negativa, Facultativa, Intracelular
Capaz de sobrevivir y multiplicarse en las clls del S. RE
No móvil, No esporulado, No posee cápsula
Variable en su forma (bacilos muy cortos, cocos o cocobacilos,
con una longitud de 0.5 a 0.7 u A por 0.5 a 1.5 L
Crece lentamente en medios aeróbicos (parcialmente
dependiente de tensiones bajas de CO2)
Colonias de tipo mucoso
T. Op. crecimiento 37 °C, pH entre 6,6 a 7,4.
Es catalasa +, Reacciones bioquímicas según cepa sea lisa o
rugosa
“A pesar de ser considerado un organismo fastidioso por sus
requerimientos en el cultivo puede crecer en medios nutritivos
mínimos”
ESPECIES DEL GÉNERO Brucella spp.
Especies
lisas
Brucella melitensis
Brucella abortus
Brucella maris
Brucella suis
Brucella neotomae
Brucella ovis
Especies
rugosas
Brucella canis
Lipopolisacári
do (sLPS)
Proteínas
(porinas)
•Brucella melitensis
Agente responsable de la mayoría de
los casos humanos. Biotipos (1-3)
La especie más patógena e invasiva
en el humano. Afecta comúnmente a
las cabras, pero puede afectar a
bovinos y cerdos.
•Brucella abortus
Principal responsable de la brucelosis bovina
Ocho biotipos (1-7 y 9)
Menor patogenicidad para los humanos.
 Afecta principalmente a bovinos, puede afectar
a búfalos, alces, jabalíes, zorros, caballos,
ciervos, camellos, perros y cerdos.
•Brucella suis
Se subdivide en 4 biotipos (14). Afecta principalmente a los
cerdos. También puede afectar
a los humanos.
•Brucella neotomae
Afecta a roedores silvestres
“rata del desierto”
•Brucella ovis
Afecta a ovinos. Estos no se
infectan fácilmente con B.
abortus pero pueden portarla y
excretarla 40 meses después
de la infección
•Brucella canis
Afecta a caninos. Su
afección en humanos es
rara vez reportada.
•Brucella maris
(B. Pinnipediae, B. Cetaceae) no hay
reporte de capacidad zoonótica. Ha
extendido el rango ecológico
TRANSMICIÒN
RESERVORIO
SALVAJE (liebre,
rata, jabalí, venado)
LECHE Y DERIVADOS
INGESTIÓN
RESERVORIO DOMÉSTICO
(vaca, búfalo, cabra, cerdo, oveja)
Contacto Indirecto
Ambiente
Vía
digestiva
Vía
inhalatoria
Contacto
Directo
PRINCIPAL Y MÁS COMÚN RUTA DE
TRANSMISIÓN
Se adquiere por contacto con
secreciones infectadas
producidas durante los
abortos o por ingestión de
productos cárnicos o lácticos
contaminados
BRUCELOSIS BOVINA
Enfermedad reproductiva caracterizada por
aborto, retención de placenta y problemas de
fertilidad en el hospedador principal.
Transmisión B. abortus en Bovinos
VÌA ORAL: al lamer fetos y descargas genitales de abortos partos e ingestión de
pastos contaminados. Exposición in utero o cuando terneros nacidos de vacas sanas,
son alimentados con calostro o leche de vacas infectadas
Excreción bacterias en descarga vaginal hasta 40 días post exposición y pre-aborto.
En secreciones, excreción masiva , hasta por 15 días después del aborto.
Después de expulsión de membranas fetales el número de microorganismos
eliminados disminuye.
La descarga cesa 2-3 meses después de la infección. Quedan portadoras que
excretan bacterias intermitentemente por muchos años
Produce importantes
pérdidas económicas:
En Colombia se han
estimado alrededor de
44.000 millones de
pesos/año.
En los bovinos,
puede cursar
asintomática o severa
La dosis, raza, edad, sexo,
tiempo de gestación, y la
resistencia natural a la
enfermedad, influencian la
evolución de la infección.
RESISTENCIA /
SUSCEPTIBILIDAD
A LA INFECCIÓN
Condiciones de
supervivencia de
Brucella abortus
Suelo: frío 48-73 días
Agua: 8-37 C 1-57 días
Heces: 1-120 días
Desperdicios 12C 1-8 meses
Concentrado > 100 días
Lana: 12 C 110 días
DETECCIÒN DE LA INFECCIÒN
• Análisis en suero de hembras >18 meses. Machos > 8 meses
• Serología para animales en movilización (venta, exportación,
ferias, matadero)
• Si hay reactores positivos aislar y solo movilizar para matadero.
• Tomar medidas conjuntas para su control y prevención entre
Propietario y Veterinario.
DIAGNÒSTICO
Cultivo y pruebas
bioquímicas:
Biología molecular:
PCR
ELISA indirecta en suero y
leche en bovinos
ELISA competitiva
Fijación de complemento
Rosa de bengala en sueros
PCR (tejidos, leches,
cultivos)
Detección directa
ELISAs
indirecta y
competitiva
Fijación de
Complemento
Rosa de Bengala
Detección indirecta
BRUCELOSIS HUMANA
Síntomas,1 ~ gripe, puede incluir fiebre, sudoración,
cefaleas, mialgias artralgias y debilidad física. Los
sistemas osteoarticulares son los más afectados, pero
en las fases agudas de la enfermedad, el corazón y el
sistema nervioso se pueden afectar. También puede
causar síntomas crónicos que incluyen fiebres
recurrentes, dolores comunes y fatiga
Transmisión
• Inoculación por cortes o abrasiones de piel en
contacto con placenta o secreciones vaginales
contaminadas.
• A través de conjuntivas.
• Inhalación de aerosoles.
• Consumo de leche cruda, derivados lácteos no
pasteurizados, carne cruda.
• Inoculación accidental de la vacuna animal C19.
Dosis infectiva 10 a 100 bacterias
• Ha sido sugerida la transmisión sexual .
BRUCELLAS QUE CAUSAN
LA INFECCIÓN EN HUMANOS
Brucella melitensis
Brucella abortus
Brucella canis
Brucella suis
BRUCELOSIS HUMANA
Sin tratamiento, la tasa de letalidad es
menor al 2% y por lo común, sucede como
consecuencia de la endocarditis.
Como la duración de la enfermedad varía
desde una pocas semanas a varios meses,
se necesitan pruebas de laboratorio para
confirmar el diagnóstico clínico.
DIAGNÒSTICO EN HUMANOS
Cultivo y pruebas
bioquímicas:
Biología molecular:
PCR
Detección: Aislamiento
Sangre o MO
ELISA
Competitiva
Fijación de
Complemento
Rosa de Bengala
TRATAMIENTO
La terapia antibiótica óptima está aún en discusión.
Debido a la localización intracelular de la Brucella, se
requiere la asociación de varios antimicrobianos
durante varias semanas.
CONTROL Y PREVENCIÓN DE BRUCELOSIS EN
HUMANOS
Control y eliminación de la infección de los
reservorios animales. (Resolución ICA 000119)
Exigencia de pasteurización de leche.
Métodos diagnósticos sensibles y específicos
disponibles
CONTROL Y PREVENCIÓN DE BRUCELOSIS EN
HUMANOS
Prevención en grupos ocupacionales:
capacitación, educación continuada, uso de
equipo de protección.
Vacunas en humanos tienen eficacia limitada.
Las vacunas vivas, se asocian con potencial de
reactivación de patogenicidad.
TÈCNICAS DE DIAGNOSTICO
•Cultivo de especimenes para el aislamiento
DIRECTAS
Cultivos
•Cultivo
masivo de bacterias para la
PCR
preparación de reactivos diagnósticos
•Amplificación de DNA por PCR
INDIRECTAS
•Rosa de Bengala
•Fijación de Complemento
•Elisa Indirecta
•Elisa Competitiva.
ROSA DE BENGALA
Antígeno: células completas e
inactivadas de Brucella abortus
Anticuerpos anti Brucella abortus
presentes en suero

Homogenización
e incubación
(Antígeno + suero)
Tinción con el colorante
Rosa de Bengala a pH 3
para favorecer la actividad
de la IgG1
Positiva:
FORMACION DE
UNA RED DE
AGLUTINACIÓN
Negativa: No Formación de la red de
aglutinación.
FIJACIÓN DE COMPLEMENTO
Antígeno Brucella abortus inactivada
Anticuerpos presentes en suero
Complemento : factor sérico presente en el
suero. Función: lisis del complejo antígenoanticuerpo. (Fuente: suero de cobayo)
Glóbulos Rojos Ovinos (GRO)
Hemolisina : anticuerpos
anti- GRO
TBC BOVINA
Enfermedad infectocontagiosa crónica
causada por bacterias
del genero
Mycobacterium.
Es una de las enfermedades más importantes del ganado bovino, tanto por
su impacto en salud pública como por sus consecuencias económicas para
un país.
Su incidencia limita el desarrollo de la ganadería y sus productos
asociados, incluyendo las exportaciones.
TBC BOVINA
IMPACTO SOCIAL
De acuerdo con lo informado recientemente por la
Organización Mundial de la Salud, el número de
casos de tuberculosis, en el hombre, supera los 8
millones al año y va en aumento. Los programas
de control y eliminación de animales infectados,
junto con la pasteurización de la leche, han
reducido drásticamente la incidencia de la
enfermedad causada por M. bovis, tanto en el
hombre como en los animales. Sin embargo, este
patógeno está presente en animales de países en
desarrollo donde no existen medidas de control
adecuadas.
TBC BOVINA
AGENTE CAUSAL
Mycobacterium bovis Afecta, además del bovino, a varias especies
animales como caprinos, ovinos cerdos, perros, gatos, monos y al
hombre por lo tanto es una enfermedad zoonotica. Otras micobacterias,
como el M. tuberculosis (humano) y el M. avium (aviar), también pueden
infectar al bovino. Las micobacterias son sensibles a los desinfectantes a
base de fenoles, y son resistentes al medio ambiente y a los
desinfectantes solubles en el agua.
TBC BOVINA
SINTOMATOLOGIA
Generalmente tiene un curso crónico
Síntomas variados afectados. La pérdida progresiva
de peso y la reducción en la producción de leche o
carne son constantes.
Con alguna frecuencia se observa una tumefacción
no dolorosa de los ganglios explorables clínicamente
Cuando hay infección hepática o intestinal se presenta
diarrea, al igual que infertilidad por endometritis
Algunas veces la tuberculosis pulmonar cursa con
signos respiratorios inespecíficos como tos crónica,
casi nunca fuerte, sin mucha fuerza.
Las lesiones predominan en pulmón y ganglios
linfáticos, en forma de nódulos o granulomas o
tubérculos de material purulento-caseoso
TBC BOVINA
La eliminación del M. bovis por parte de los
animales afectados es intermitente. Puede
suceder en las etapas tempranas de la
enfermedad, cuando aún no son detectables por
la prueba de diagnóstico.
Vía más frecuente (80 a 90%) de infección: vía
aerógena. Aerosoles, toses y secreciones de
animales enfermos que expelen gran cantidad de
microgotitas que contienen la bacteria.
Vía digestiva (10 a 20% de los casos): por el
consumo de pastos y alimentos contaminados con
secreciones nasales, materia fecal y orina que
contienen el agente causal.
TBC BOVINA
Otras vías no usuales pero probables
son: la vía cutánea, congénita y genital.
Vía congénita (madre-feto) puede ocurrir
hasta en 5% de las vacas afectadas
Vía genital, los toros se infectan
sirviendo vacas con metritis tuberculosa
La transmisión más importante se
produce por medio de la inseminación
artificial, al utilizar semen de toros
infectados
TBC BOVINA
¿POR QUÉ CONTROLAR LA
ENFERMEDAD?
Hay tres razones claves para controlar y/o erradicar la TBC:
 Porque se transmiten al hombre, principalmente a los que trabajan en
contacto con animales infectados (veterinarios, trabajadores rurales y
personal de frigoríficos).
 Porque limitan el comercio internacional de productos cárnicos y
lácteos, influyendo negativamente en la rentabilidad de las
explotaciones.
 Porque estas enfermedades generan importantes pérdidas
económicas en la producción de carne y leche.
TBC BOVINA
DIAGNÒSTICO
METODOS
DIRECTOS
En las plantas de sacrificio la inspección de
canales es una actividad básica en la vigilancia
epidemiológica de la tuberculosis bovina, ya que
es allí donde se detectan en los bovinos las
lesiones macroscópicas que se ven a simple vista.
La presencia de tumoraciones en los diferentes órganos
Ganglios medianísticos
medios aumentados de
tamaño y múltiples
tubérculos pequeños de
tipo caseoso
El foco de necrosis presenta una coloración amarillenta
con apariencia caseificada y es posible detectar la
presencia de calcio; durante la necropsia se perciben
como pequeñas granulaciones blanquecinas que crepitan
al cortar con el cuchillo.
También puede observarse exudado de apariencia
purulenta en meninges.
TBC BOVINA
DIAGNÒSTICO
METODOS
DIRECTOS
1) Coloración de Ziehl Nielsen: identifica la
presencia de bacilos acido alcohol resistentes,
no formadores de esporas inmóviles y no
encapsulados, características del género
Mycobacterium.
2) Histopatalogía, proporciona resultados
presuntivos. En cualquiera de las formas en
que se presenta la tuberculosis, esta se
caracteriza por la formación de granulomas. Se
pueden detectar bacilos ácido alcohol
resistentes libres en el citoplasma de los
macrófagos, histiocitos y células gigantes de la
lesión granulomatosa.
TBC BOVINA
DIAGNÒSTICO
METODOS DIRECTOS
El cultivo bacteriológico proporciona el diagnóstico definitivo de la enfermedad.
Las micobacterias son aerobios obligados que crecen en medios sintéticos simples,
pero para el aislamiento primario a partir de muestras clínicas se requiere de un
medio más complejo como el medio Löwestein-Jensen, o como el medio
Middlebrook.
El cultivo dura de 3 a 6 semanas en desarrollarse, las colonias son pequeñas, secas
y con aspecto escamoso.
El material requerido para aislar el M. bovis debe ser ganglios, pulmones, hígado,
bazo, riñón, pleura o cualquier otro tejido donde se aprecien las lesiones
características.
TBC
BOVINA
DIAGNÒSTICO
METODOS NDIRECTOS
Evalúan la Rta mediada por células. El PPD bovino es un derivado proteico
purificado producido a partir de cultivos inactivados de Mycobacterium bovis.
Prueba Tuberculinica Cervical Simple:
consiste en la inoculación intradérmica de 0,1 ml de PPD
bovina, previa limpieza con un producto no-irritante, en
el tercio medio del cuello, previo corte de pelo a
maquina o tijera en el lugar de inyección, en una
superficie de 5 a 6 cm. La lectura se hace a las 72
horas (más o menos 6 horas). Las reacciones se
consideran negativas cuando no se observa ni palpa
ningún cambio en la piel del sitio de aplicación y
reactoras cuando es visible y/o palpable un
engrosamiento de 4-5 mm.
TBC BOVINA
DIAGNÒSTICO
METODOS NDIRECTOS
Prueba Tuberculinica Ano-Caudal:
Eesta prueba se realiza en el pliegue ano-caudal interno a unos 6 cm. de la base
de la cola y en el en el tercio medio del pliegue ano-caudal interno. Esta zona
es menos sensible a la tuberculina que la piel del cuello. Se inyectan 0.1 ml
de PPD bovina, previa limpieza con un producto no-irritante. La lectura se
hace a las 72 horas (más o menos 6 horas). Las reacciones se consideran
negativas cuando no se observa ni palpa ningún cambio en la piel del sitio de
aplicación y reactoras cuando es visible y/o palpable un engrosamiento de 45 mm.
TBC BOVINA
DIAGNÒSTICO
METODOS NDIRECTOS
Prueba tuberculínica comparativa:
La prueba intradérmica comparativa se utiliza para la realización de un diagnostico
diferencial entre animales infectados por Mycobacterium bovis y aquellos
sensibilizados a la tuberculina por exposición a otras micobacterias. Esta prueba
consiste en la inyección de tuberculina bovina y tuberculina aviar, previa limpieza
con un producto no irritante, en diferentes puntos del cuello y en la subsiguiente
evaluación de la respuesta transcurridas 72 horas. Para esta prueba comparativa
la dosis de tuberculina no debe ser inferior a 2.000 UI de tuberculina bovina ni a
2.00 UI de tuberculina aviar. La distancia entre ambas inyecciones debe ser de
aproximadamente 12 a 15 cm. Un animal se considera positivo cuando en la zona
de inyección de la tuberculina bovina hay una reacción de 4mm mayor que la
tuberculina aviar y se considera dudoso cuando esa reacción es entre 1 y 4mm
mayor que la tuberculina aviar. El animal es negativo cuando no hay reacción o
cuando la reacción es igual o menor que la tuberculina aviar.
TBC BOVINA
DIAGNÒSTICO
METODOS NDIRECTOS
Otras pruebas que estudian la respuesta de tipo
celular detectando la presencia de citocinas
circulantes incluyen:
La prueba de gamma-Interferón
Se realiza con sangre completa y tiene mayor sensibilidad y especificidad
que la intradermo reacción. Se emplean los mismos antígenos (PPD) y
detecta el mismo grupo de animales infectados. Las ventajas con
respecto a la intradermo reacción es que el animal se maneja sólo una
vez. Los inconvenientes son su costo y la necesidad de procesar la
sangre inmediatamente después de su extracción.
Prueba de ELISA Indirecta
Detección de anticuerpos séricos. Posee baja sensibilidad, pero es muy
fiable en la detección de vacas "anérgicas" a las pruebas de la
tuberculina y gamma-Interferón.
TBC BOVINA
DIAGNÒSTICO
METODOS NDIRECTOS
Reacción en cadena de la polimerasa (PCR)
Amplificación de secuencias génicas, Su eficacia radica en la
rápida identificación de patógenos de difícil cultivo. En ese
contexto, el desarrollo de un procedimiento que identifica
directamente M. bovis en muestras de tejido y secreción
proveniente de animales tuberculosos debe ser el objetivo de
todos los países.
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