REPRODUCCION IN VITRO DE PLANTAS
RELACIONADAS A LA ZOOCRIA DE MARIPOSAS
Max Paniagua Sánchez
Javier Viquez Ruiz
Marleny Bogarin Fonseca
Martha Oliva Umaña
Núcleo Agropecuario
Objetivo
• Desarrollar y aplicar un protocolo de
propagación in vitro cuatro especies
pertenecientes a la familia Passifloraceae
en base a sus condiciones biológicas y a su
importancia en la zoocría de mariposas.
Objetivos específicos
•Producir in vitro las siguientes especies: Passiflora
platyloba, P. ambigua, P. oerstedii, P. pittieri, P. biflora, P.
vitifolia y P. talamacensis.
•
•Contribuir al desarrollo y la aplicación de biotécnicas para
la propagación
masiva de especies vegetales de
importancia para la zoocria de mariposas y la
conservación de la biodiversidad.
•
•Desarrollar protocolos para la propagación de
vitropassifloras incluidas en alguna categoría de amenaza
biológica y que son de interés para la producción de
lepidópteros comerciales.
•
•Determinar un medio de cultivo y tipo de explante
adecuado para la propagación de pasifloras de
importancia para la zoocría de lepidópteros.
Metodología
•LCV de la GM 2010.
•Selección, obtención y preparación de
la planta madre o pie de cría.
•Elección y desinfección de los
explantes. (MLF)
•Introducción del material seleccionado
in vitro (siembra ½ de cultivo). 6
Tratamientos.
•Multiplicación de brotes o incubación
•Enraizamiento
•Aclimatación
Resultados
Resultados
Objetivo General: Elaborar el protocolo de propagación in vitro de al menos cuatro especies de la familia Passifloraceae
durante el 2010, debido a su importancia en la zoocría de mariposas.
Estado de avance (%)
Resultados obtenidos
Observaciones
Metas
Determinar el medio de cultivo
100
El medio de cultivo MS donde se Se propone un medio de cultivo
más
apropiado
para
la
utilizó BA, se obtuvo que la MS en agar o phytagel con
propagación de pasifloras con
regeneración de microestacas y ANA(1 y 2) para estimular el
mayor utilidad en la producción
láminas foliares se realizó de mejor desarrollo radicular.
comercial de mariposas.
manera en la concentración 1,2 en
comparación con la 0,9.
Producir in vitro las siguientes
especies: Passiflora platyloba, P.
ambigua, P. oerstedii, P. pittieri, P.
biflora, P. vitifolia
y
P.
talamacensis
100
Desarrollar los protocolos para la
propagación de vitropassifloras de
interés para la producción de
mariposas y que se encuentren en
alguna categoría de amenaza
biológica.
100
Se estableció el protocolo para la
micropropagación
de
las
siguientes especies:
Passiflora platyloba, P. oerstedii, P.
pittieri, P. quadrangularis y P.
apetala.
Determinar qué tipo de explante
presenta mayor sobrevivencia y
menor tiempo de desarrollo por
especie de planta estudiada de
acuerdo al medio de cultivo.
En cuanto a la fase de
aclimatación
de
dichas
especies, todavía no se ha
implementado, sólo está a nivel
de propuesta en el protocolo.
100
Se han sembrado y establecido con
éxito las siguientes especies: P.
oerstedii, P. pittieri, P. biflora, P.
platyloba. Para el caso de la
Passiflora talamacensis y Passiflora
ambigua no hubo porcentaje de
regeneración, lo cual se asume a la
presencia de un hongo endógeno
A pesar de que se cultivaron las
especies Passiflora ambigua y
P. talamacensis, con muestras
de varias zonas del país y en
repetidas ocasiones no hubo
regeneración, lo cual se asume
a la presencia de hongos
endógenos. Sin embargo se
requiere una investigación más
exhaustiva y específica para
dichas especies, ya que son de
gran importancia en la zoocría
de
algunas
especies
de
Heliconius.
Se probaron
dos tipos de
explantes: láminas foliares y
microestacas; ambas presentaron
buen nivel de regeneración; sin
embargo es notable la mejor
eficiencia de las láminas foliares
cultivadas en el MS con BA al 1,2.
En cuanto al medio de cultivo al
cual se le agregó ANA, los
mejores resultados en cuanto al
crecimiento radicular, se han
obtenido en la concentración 2.
Conclusiones
•Se cultivaron especies en ½ s de phytagel y agar, para
identificar en cuál se tenía un mejor resultado en cuanto a
vitrificación; siendo el más positivo en agar.
•Especies como la Passiflora talamacensis, P. auriculata y
P. ambigua, las cuales ha pesar de que se sembraron en al
menos cinco veces no sobrevivieron debido al ataque de
hongos endógenos.
• Passiflora lobata y Passiflora dispar; sobrevivieron hasta
el inicio de abril debido a condiciones propias de las plantas
(nivel alto de latencia); lo anterior por razones de adecuar
los niveles de nutrimentos en el medio de cultivo y a las
condiciones ambientales (luz y temperatura).
Conclusiones
•Se determinó que el nivel óptimo de PH corresponde a un valor
de 5,6, con lo cual se asegura que sea un medio donde las
microestacas o láminas foliares empiecen con la organogénesis
de callos o con el crecimiento diferenciado.
•La temperatura óptima para el crecimiento y desarrollo de las
microestacas y láminas foliares se tiene un rango de 22-26 ºC, ya
que se determinó que cuando por factores externos la
temperatura incrementó hasta 28 ºC se identificaron ½ s que se
volvían líquidos luego de cultivados, lo cual contribuyó con la
mortalidad de las especies.
•Se tiene la utilización de ANA como estimulante de la radificación,
lo cual se ha evidenciado sobre todo en las especies Passiflora
pittieri y Passiflora platyloba.
Recomendaciones
•Realizar una investigación sobre las pasifloras que
mostraron una regeneración nula y alta mortalidad, ello para
verificar si se debe a condiciones endógenas o a
requerimientos nutricionales, de desinfección o ambientales
específicas.
•Se sugiere que los nutrientes tanto micronutrientes como
macronutrientes adicionados al medio de cultivo, sean de
elaboración reciente, para lograr que los medios de cultivo
se solidifiquen de forma correcta.
•Es necesario un control de dos veces por día de la
temperatura donde se incuban los medios de cultivo ya
sembrados, ello con el fin de asegurar que no haya un
aumento o descenso que ocasione trastornos en el proceso
de regeneración.
Recomendaciones
•Establecer nexos con productores de mariposas para
identificar la preferencia en cuanto a la alimentación de
larvas y calidad de las pupas en relación a las plantas
generadas por medio del cultivo in vitro.
•Promover a los productores el uso racional de los recursos
del bosque para obtención de plantas madre para la
alimentación de mariposas en un zoocriadero; para
contribuir con la restauración de los ecosistemas,
disminuyendo la presión hacia las poblaciones de pasifloras.
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