INMUNOHEMATOLOGIA
APLICADA
Identificación de anticuerpos
irregulares
Dr. Carlos Alberto González
Objetivos de aprendizaje
• Tema 1: Cuándo identificar anticuerpos
• Tema 2: Para qué sirve identificar anticuerpos
• Tema 3: Cómo identificar anticuerpos
 Pre-analítico
 Analítico
 Post-analítico
Inicio de sección
No existe ningún método para
detectar el error en la identificación
de un anticuerpo
SOLO SE DETECTA POR REACCIÓN
HEMOLÍTICA POST TRANSFUSIONAL
Identificación de anticuerpos
irregulares
1) ¿Cuándo hay que identificar los anticuerpos?
2) ¿Para qué sirve identificar anticuerpos?
3) ¿Cómo identificar los anticuerpos?
Identificación de anticuerpos
irregulares
1) ¿Cuándo hay que identificar los anticuerpos?
Prueba de Antiglobulina Indirecta
Negativa
Negativa
Prueba
Cruzada
Positiva
Si hay registro previo de
PAI+ seleccionar GR
Antígeno Negativo
1. Incompatibilidad ABO
2. Donante PAD+
3. Ac Baja Incidencia
Positiva
1. Identificar el Ac
2. Efecto de Dosis
3. Anti-LebH, -H, -IH
1. Identificar el Ac
2. Seleccionar GR Antígeno
Negativo y cruzar
Identificación de anticuerpos
irregulares
1) ¿Cuándo hay que identificar los anticuerpos?
2) ¿Para que sirve identificar anticuerpos?
Para asignar significado clínico
Para buscar anticuerpos adicionales en aloinmunizados
Identificación de anticuerpos
irregulares
Anticuerpo capaz de producir:
1) Hemólisis post transfusional
2) Enfermedad Hemolítica Feto Neonatal
3) Daño en el tejido trasplantado
Para asignar significado clínico
Identificación de anticuerpos
irregulares
Incidencia: 2 % pacientes 1 o más Ac clínicamente
significativos. 98 % NO presenta Ac CS
8,4 % desarrollan Ac entre 2 y 24 sem de transfundido.
76 % son Ac del Sistema Rh (vox sang 1996; 71: 216)
Para asignar significado clínico
Significado clínico de los
aloanticuerpos
Importantes
ABO
Rh
Kell
Duffy
Kidd
S, s, U
Vel
Solo si + a 37º C
A veces
Benigno
Lea
M, N
P1
Lutheran
A1
Yta
Ge
Gya
Hy
Sda
Knops
Chido/Rogers
Xga
HLA/Bg,
Csa, Yka, McCa
JMH
Para asignar significado clínico
Reacción Hemolítica/Serológica
Post-Transfusional
0%
20%
40%
60%
80%
A1
D
E
e
C
c
Cw
G
K
Kpa
Jsa
Fya
Fyb
Jka
JKb
Reacción Hemolítica
ISBT Science Series 2012; 7: 54-57
Reacción Serológica
100%
Identificación de anticuerpos
irregulares
Implicancia en Enfermedad Hemolítica Feto Neonatal
Clínicamente no significativo
Anti-A1, -Kpa,
Anti-M (no activo a 37º C), –N,
Anti-P1, -Lea, -Leb, -Lea+b, -Lua, -I
Clínicamente Significativo
Leve
Severa o Moderada
Anti-D,
Anti-e, -E, -Dib
Anti-C, -Fya, -Jka,
Anti-c,
Anti-Fyb, -Jkb, Anti-M (activo a 37º C),
Ac Sist Kell
Anti-M, -S,-s,
Anti-S, -s,–Dia
Para asignar significado clínico
Identificación de anticuerpos
irregulares
1) ¿Cuándo hay que identificar los anticuerpos?
2) ¿Para qué sirve identificar anticuerpos?
3) ¿Cómo
identificar los
anticuerpos?
• Pre-analítico
• Analítico
• Post-analítico
Identificación de anticuerpos
irregulares
Diagnóstico
Tratamiento
3) ¿Cómo
identificar los
anticuerpos?
Etnia
• Pre-analítico
Registros previos
Pre-analítico
Diagnóstico
Tratamiento
Autoinmunes, onco, infecc
PAD/PAI +; hemólisis
Drepanocitosis, talasemia
> Frecuencia aloAc
Hipergammaglobulinemia
PAD+ no significativa
Tx < 3
meses
Drogas
C. GR
Campo mixto, RHPT
Pl, C pqt, hd
PAD/PAI +; discrepancias
PAD/PAI +; hemólisis
Pre-analítico
Etnia
Registros previos
Asociación con fenotipos negativos
Discrepancias ABO, sensibilización
Pre-analítico
Asociación con fenotipos negativos
Etnia
Etnia
Afroamericana
Americanos / Orientales
Caucásica
Polinesia
FENOTIPO
U- Negativo; Js(b-)
FRECUENCIA
1/100
Fy(a-b-)
Di(b-)
K+k-; Lu(a+b-); Co(a-)
Kp(a+b-)
68%
<1/100
1/500
1/5.000
Jk(a-b-)
1 c/110
Pre-analítico
Etnia
Asociación con fenotipos negativos
Frecuencia de fenotipo
E-, C-, Fy(a-), K-, Jk(b-)
en donantes:
7% caucásicos
93% afroamericanos
Pre-analítico
Etnia
Unidades
Incompatibles
Algunas
La mitad
La mayoría
Casi todas
Todas
Asociación con fenotipos negativos
Anticuerpos más frecuentes
Caucásica
Afro-americana
Oriental
-K, -Lua
-K, -Kpa
-K, -Dia
-Jka, -Fya, -E
-Jka, -E, -Fya
Rh-: -D
Rh-: -D
-c
Rh+: -c, -Fyb
Rh+: -c
-e, -k, -Yta, -Lub -e, -U, -Jsb, -Fy3
-e, -Yta
-Kpb, -Vel, -Lan
-Hy, -Joa, -Ata
-Dib, -Jkab
Identificación de anticuerpos
irregulares
Detección e
Identificación de
Pruebas Anticuerpos
Tipificación
eritrocitaria
3) ¿Cómo
identificar los
anticuerpos?
Conocido
(reactivos)
Desconocido
(muestra)
Paneles
globulares
Suero
Reactivos
séricos
Hematíes
• Pre analítico
• Analítico
Analítico
Muestra: Plasma vs suero (tiempo de extracción)
Reactivos globulares
Suero Antiglobulina (SAG)
• Poliespecífico vs monoespecíficos
Potenciadores
• MBFI – PEG – ENZ – ALB – CAT – fase sólida
Analítico
Muestra: Plasma vs suero (tiempo de extracción)
Paciente transfundido
entre (en días)
3 -14
15 -28
29 - 90
Muestra a ser tomada
antes de transfundir
(no más de)
24 horas
72 horas
1 semana
Analítico
Muestra: Plasma vs suero (tiempo de extracción)
Reactivos globulares
Panel selector
• Detección de
Anticuerpos
• 2 vs 3 células
• Células homocigotas
Panel Identificador
• Identificación de
Anticuerpos
• 8, 10, 11 o más células
• Versión extendida del
selector
Panel Identificador
Cada frasco del panel corresponde a un donante tipificado para
los antígenos mas importantes (mostrado en cartilla)
+ presencia del antígeno
- ausencia del antígeno
Donantes son Grupo O
Rh
Kell
Kidd
Duffy
Lewis
D C E
c
e
K
k
Jka
Jkb
Fya
Fyb
Lea
Leb
1
0
+
0
+
+
0
+
+
0
+
+
+
10
0
0
0
+
+
0
+
+
0
+
0
0
MNS
P
M N
S
s
P1
0
+
+
+
+
+
+
+
0
0
+
0
AC
Fenotipo donante 10 tiene 9 antígenos presentes:
c, e, k, Jka , Fya, Leb, M y s
Panel Identificador
Autocontrol vs Prueba de Antiglobulina Directa (PAD)
Rh
Kell
Kidd
Duffy
Lewis
MNS
D C E
c
e
K
k
Jka
Jkb
Fya
Fyb
Lea
Leb
1
0
+
0
+
+
0
+
+
0
+
+
+
10
0
0
0
+
+
0
+
+
0
+
0
0
P
M N
S
s
P1
0
+
+
+
+
+
+
+
0
0
+
0
AC
Negativo
Autocontrol
Aloanticuerpo
Autoanticuerpo
Positivo
Aloanticuerpo
GR + suero
Reacción hemolítica
post transfusional
Campo mixto
Panel Identificador
Mismas fases que detección de anticuerpos
LIS: Lectura inmediata a
temperatura ambiente: IgM
37°: Lectura post incubación a 37o C:
IgG o IgM alto rango térmico
SAG: Lectura en medio
antiglobulina humana: IgG
Rh
D
C
E
c
e
1
0
+
0
+
+
2
+
+
0
0
+
3
+
+
0
0
+
4
+
0
+
+
0
LIS
37º C SAG CC
CC: Control de Coombs
Fase LIS
Realizar la lectura inmediata en salino y leer
aglutinación, hemólisis (puntuación)
Registrar los resultados en su columna:
Rh
Kell
Kidd
Duffy
Lewis
D C E
c
e
K
k
Jka
Jkb
Fya
Fyb
Lea
Leb
1
0
+
0
+
+
0
+
+
0
+
+
+
2
+
+
0
0
+
0
+
+
0
0
+
3
+
+
0
0
+
+
+
0
+
+
+
Hasta el ultimo tubo
MNS
P
LIS
M N
S
s
P1
0
+
+
+
+
+
2+
0
+
+
+
0
+
+
0
0
+
+
0
+
+
+
0
37º C
SAG
CC
Negativo
1+
2+
3+
4+
Hemólisis
Potencia de las reacciones
Fases de reacción
Reacción en Fase única
Homogénea c/
todas las células
Anticuerpo
único
Varía c/ ≠ Fase
Varía c/ ≠ células
Efecto de dosis
Heterocigotas:
reacciones
Débiles o negativas
No deben ser tachadas al excluir.
Homocigotas:
reacciones
intensas
Anticuerpos
múltiples
IgM + IgM
IgG + IgG
Anticuerpos
múltiples
IgM + IgG (?)
Fase a 37°C
Se continúa con lectura a 37º C y se registran
los resultados
Rh
Kell
Kidd
Duffy
Lewis
P
LIS
37º C
+
2+
0
+
+
0
0
+
+
+
0
0
+
0
+
+
2+
0
0
+
+
0
+
0
0
+
+
0
0
+
+
0
0
+
0
+
+
+
+
+
2+
0
0
0
0
+
+
0
+
+
0
0
0
+
+
0
+
0
+
0
0
2+
0
+
0
0
+
+
0
0
+
0
0
0
0
0
D C E
c
e
K
k
Jka
Jkb
Fya
Fyb
Lea
Leb
1
0
+
0
+
+
0
+
+
0
+
+
+
2
+
+
0
0
+
0
+
+
0
0
+
3
+
+
0
0
+
+
+
0
+
+
4
+
0
+
+
0
0
+
+
+
5
0
0
+
+
+
0
+
+
6
0
0
0
+
+
0
+
7
0
0
0
+
+
0
8
0
0
0
+
+
9
0
0
0
+
10
0
0
0
+
AC
MNS
M N
S
s
P1
0
+
+
+
+
0
+
+
+
0
+
0
+
+
0
0
+
+
0
+
+
0
+
0
+
+
+
+
0
0
+
0
+
0
+
+
+
+
0
0
+
0
+
+
+
+
0
+
+
0
SAG
CC
Fase SAG
Se continúa con prueba de antiglobulina, se registran
los resultados
Rh
Kell
Kidd
Duffy
Lewis
P
LIS
37º C
SAG
+
2+
0
0
+
+
0
0
0
+
+
+
0
0
0
+
0
+
+
2+
0
0
0
+
+
0
+
0
0
0
+
+
0
0
+
+
0
0
0
+
0
+
+
+
+
+
2+
0
0
0
0
0
+
+
0
+
+
0
0
0
0
+
+
0
+
0
+
0
0
2+
0
0
+
0
0
+
+
0
0
+
0
0
0
0
0
0
0
D C E
c
e
K
k
Jka
Jkb
Fya
Fyb
Lea
Leb
1
0
+
0
+
+
0
+
+
0
+
+
+
2
+
+
0
0
+
0
+
+
0
0
+
3
+
+
0
0
+
+
+
0
+
+
4
+
0
+
+
0
0
+
+
+
5
0
0
+
+
+
0
+
+
6
0
0
0
+
+
0
+
7
0
0
0
+
+
0
8
0
0
0
+
+
9
0
0
0
+
10
0
0
0
+
AC
MNS
M N
S
s
P1
0
+
+
+
+
0
+
+
+
0
+
0
+
+
0
0
+
+
0
+
+
0
+
0
+
+
+
+
0
0
+
0
+
0
+
+
+
+
0
0
+
0
+
+
+
+
0
+
+
0
CC
Fase SAG
Todas las células negativas en SAG,
agregar “Control de Coombs”
Rh
Kell
Kidd
Duffy
Lewis
P
LIS
37º C
SAG
CC
+
2+
0
0

+
+
0
0
0

+
+
+
0
0
0

+
0
+
+
2+
0
0

0
+
+
0
+
0
0
0

+
+
0
0
+
+
0
0
0

+
0
+
+
+
+
+
2+
0
0

0
0
0
+
+
0
+
+
0
0
0

0
+
+
0
+
0
+
0
0
2+
0
0

+
0
0
+
+
0
0
+
0
0
0
0

0
0
0

D C E
c
e
K
k
Jka
Jkb
Fya
Fyb
Lea
Leb
1
0
+
0
+
+
0
+
+
0
+
+
+
2
+
+
0
0
+
0
+
+
0
0
+
3
+
+
0
0
+
+
+
0
+
+
4
+
0
+
+
0
0
+
+
+
5
0
0
+
+
+
0
+
+
6
0
0
0
+
+
0
+
7
0
0
0
+
+
0
8
0
0
0
+
+
9
0
0
0
+
10
0
0
0
+
AC
MNS
M N
S
s
P1
0
+
+
+
+
0
+
+
+
0
+
0
+
+
0
0
+
+
0
+
+
0
+
0
+
+
+
+
0
0
+
0
+
0
+
+
+
+
0
0
+
0
+
+
+
+
0
+
+
0
Aglutinación en 4 tubos …
y ahora?
Rh
Kell
Kidd
Duffy
Lewis
P
LIS
37º C
SAG
CC
+
2+
0
0

+
+
0
0
0

+
+
+
0
0
0

+
0
+
+
2+
0
0

0
+
+
0
+
0
0
0

+
+
0
0
+
+
0
0
0

+
0
+
+
+
+
+
2+
0
0

0
0
0
+
+
0
+
+
0
0
0

0
+
+
0
+
0
+
0
0
2+
0
0

+
0
0
+
+
0
0
+
0
0
0
0

0
0
0

D C E
c
e
K
k
Jka
Jkb
Fya
Fyb
Lea
Leb
1
0
+
0
+
+
0
+
+
0
+
+
+
2
+
+
0
0
+
0
+
+
0
0
+
3
+
+
0
0
+
+
+
0
+
+
4
+
0
+
+
0
0
+
+
+
5
0
0
+
+
+
0
+
+
6
0
0
0
+
+
0
+
7
0
0
0
+
+
0
8
0
0
0
+
+
9
0
0
0
+
10
0
0
0
+
AC
MNS
M N
S
s
P1
0
+
+
+
+
0
+
+
+
0
+
0
+
+
0
0
+
+
0
+
+
0
+
0
+
+
+
+
0
0
+
0
+
0
+
+
+
+
0
0
+
0
+
+
+
+
0
+
+
0
Interpretación de los resultados
Pasos
1. “Exclusión” tachar los antígenos que no
reaccionaron
2. Marcar los antígenos no tachados
3. Considerar el medio/fase óptimo de reacción
del anticuerpo
4. Buscar la clave patrón
Interpretación de los resultados
Pasos
1. “Exclusión” tachar los antígenos que no
reaccionaron
Regla de Landsteiner:
Los individuos NO desarrollan
anticuerpos contra sus propios
antígenos
Interpretación de los resultados
Pasos
1. “Exclusión” tachar los antígenos que no
reaccionaron
Un anticuerpo solo reaccionará con
eritrocitos que tengan el
correspondiente antígeno; los
anticuerpos no reaccionarán con
eritrocitos que no tengan el antígeno
1. Exclusión
Tachar los antígenos que NO REACCIONARON en ninguna
fase; y NO tachar los heterocigotas (efecto de dosis)
Rh
Kell
Kidd
Duffy
Lewis
P
LIS
37º C
SAG
CC
+
2+
0
0

+
+
0
0
0

+
+
+
0
0
0

+
0
+
+
2+
0
0

0
+
+
0
+
0
0
0

+
+
0
0
+
+
0
0
0

+
0
+
+
+
+
+
2+
0
0

0
0
0
+
+
0
+
+
0
0
0

0
+
+
0
+
0
+
0
0
2+
0
0

+
0
0
+
+
0
0
+
0
0
0
0

0
0
0

D C E
c
e
K
k
Jka
Jkb
Fya
Fyb
Lea
Leb
1
0
+
0
+
+
0
+
+
0
+
+
+
2
+
+
0
0
+
0
+
+
0
0
+
3
+
+
0
0
+
+
+
0
+
+
4
+
0
+
+
0
0
+
+
+
5
0
0
+
+
+
0
+
+
6
0
0
0
+
+
0
+
7
0
0
0
+
+
0
8
0
0
0
+
+
9
0
0
0
+
10
0
0
0
+
AC
MNS
M N
S
s
P1
0
+
+
+
+
0
+
+
+
0
+
0
+
+
0
0
+
+
0
+
+
0
+
0
+
+
+
+
0
0
+
0
+
0
+
+
+
+
0
0
+
0
+
+
+
+
0
+
+
0
2. Marcar los antígenos no tachados
Rh
Kell
Kidd
Duffy
Lewis
P
LIS
37º C
SAG
CC
+
2+
0
0

+
+
0
0
0

+
+
+
0
0
0

+
0
+
+
2+
0
0

0
+
+
0
+
0
0
0

+
+
0
0
+
+
0
0
0

+
0
+
+
+
+
+
2+
0
0

0
0
0
+
+
0
+
+
0
0
0

0
+
+
0
+
0
+
0
0
2+
0
0

+
0
0
+
+
0
0
+
0
0
0
0

0
0
0

D C E
c
e
K
k
Jka
Jkb
Fya
Fyb
Lea
Leb
1
0
+
0
+
+
0
+
+
0
+
+
+
2
+
+
0
0
+
0
+
+
0
0
+
3
+
+
0
0
+
+
+
0
+
+
4
+
0
+
+
0
0
+
+
+
5
0
0
+
+
+
0
+
+
6
0
0
0
+
+
0
+
7
0
0
0
+
+
0
8
0
0
0
+
+
9
0
0
0
+
10
0
0
0
+
AC
MNS
M N
S
s
P1
0
+
+
+
+
0
+
+
+
0
+
0
+
+
0
0
+
+
0
+
+
0
+
0
+
+
+
+
0
0
+
0
+
0
+
+
+
+
0
0
+
0
+
+
+
+
0
+
+
0
3. Considerar el medio/fase óptimo
de reacción del anticuerpo
Anti-Lea es un IgM fría reactiva en LIS.
Anti-E es IgG reactivo a 37º C /SAG
Rh
Kell
Kidd
Duffy
Lewis
P
LIS
37º C
SAG
CC
+
2+
0
0

+
+
0
0
0

+
+
+
0
0
0

+
0
+
+
2+
0
0

0
+
+
0
+
0
0
0

+
+
0
0
+
+
0
0
0

+
0
+
+
+
+
+
2+
0
0

0
0
0
+
+
0
+
+
0
0
0

0
+
+
0
+
0
+
0
0
2+
0
0

+
0
0
+
+
0
0
+
0
0
0
0

0
0
0

D C E
c
e
K
k
Jka
Jkb
Fya
Fyb
Lea
Leb
1
0
+
0
+
+
0
+
+
0
+
+
+
2
+
+
0
0
+
0
+
+
0
0
+
3
+
+
0
0
+
+
+
0
+
+
4
+
0
+
+
0
0
+
+
+
5
0
0
+
+
+
0
+
+
6
0
0
0
+
+
0
+
7
0
0
0
+
+
0
8
0
0
0
+
+
9
0
0
0
+
10
0
0
0
+
AC
MNS
M N
S
s
P1
0
+
+
+
+
0
+
+
+
0
+
0
+
+
0
0
+
+
0
+
+
0
+
0
+
+
+
+
0
0
+
0
+
0
+
+
+
+
0
0
+
0
+
+
+
+
0
+
+
0
4. Buscar la clave patrón
Anti-E no es patrón y
es un Ac caliente
Rh
Interpretación: anti-Lea
Kell
Kidd
Duffy
Lewis
P
LIS
37º C
SAG
CC
+
2+
0
0

+
+
0
0
0

+
+
+
0
0
0

+
0
+
+
2+
0
0

0
+
+
0
+
0
0
0

+
+
0
0
+
+
0
0
0

+
0
+
+
+
+
+
2+
0
0

0
0
0
+
+
0
+
+
0
0
0

0
+
+
0
+
0
+
0
0
2+
0
0

+
0
0
+
+
0
0
+
0
0
0
0

0
0
0

D C E
c
e
K
k
Jka
Jkb
Fya
Fyb
Lea
Leb
1
0
+
0
+
+
0
+
+
0
+
+
+
2
+
+
0
0
+
0
+
+
0
0
+
3
+
+
0
0
+
+
+
0
+
+
4
+
0
+
+
0
0
+
+
+
5
0
0
+
+
+
0
+
+
6
0
0
0
+
+
0
+
7
0
0
0
+
+
0
8
0
0
0
+
+
9
0
0
0
+
10
0
0
0
+
AC
MNS
M N
S
s
P1
0
+
+
+
+
0
+
+
+
0
+
0
+
+
0
0
+
+
0
+
+
0
+
0
+
+
+
+
0
0
+
0
+
0
+
+
+
+
0
0
+
0
+
+
+
+
0
+
+
0
Regla de 3
Para confirmar el anticuerpo debe
cumplirse la Regla de 3
El valor de p debe ser ≤ 0.05
Esto da un 95% intervalo de confianza
¿Cómo demonstrarlo?
• El suero del paciente debe reaccionar:
 Positivo con 3 hematíes que portan el antígeno
 Negativo con 3 hematíes sin el antígeno
• Usando células adicionales
Regla de 3
1, 4, 7 y 9 son positivas para el antígeno y reaccionan
2, 3, 5, 6, 8 y 10 son negativas para el antígeno y no reaccionan
Rh
Kell
Kidd
Duffy
Lewis
D C E
c
e
K
k
Jka
Jkb
Fya
Fyb
Lea
Leb
1
0
+
0
+
+
0
+
+
0
+
+
+
2
+
+
0
0
+
0
+
3
+
+
0
0
+
+
0
4 +células
+ positiva
+
0
+
+
4
+
0
+
+
0
0
+
+
+
5
0
0
+
+
+
0
+
+
6
0
0
0
+
+
0
+
7
0
0
0
+
+
0
8
0
0
0
+
+
9
0
0
0
+
10
0
0
0
+
AC
MNS
P
LIS
37º C
SAG
CC
+
2+
0
0

+
+
0
0
0

+
+
+
0
0
0

0
+
+
2+
0
0

0
0
0

0
0
0

+
2+
0
0

+
+
0
0
0

+
0
0
2+
0
0

0
+
0
0
0
0

0
0
0

M N
S
s
P1
0
+
+
+
+
0
+
+
+
0
+
0
+
+
0
0
+
+
0
+
+
+
0
+
0
+
+
+
+
0
0
+
+negativas
0 0 + +
+
0
+
0
+
+
0
+
+
+
+
+
+
+
0
0
0
0
0
+
+
0
+
0
+
+
+
0
+
+
0
+
0
+
0
+
+
0
+
0
0
+
+
0
0
06 células
+ + 0 +
Tipificación
La tipificación del antígeno de los hematíes confirma la
especificidad del anticuerpo
Realizarlo si el paciente no ha sido recientemente
transfundido:
• Separación de neocitos
• Biología molecular
Múltiples anticuerpos
Procedimientos para identificar múltiples anticuerpos
•
•
•
•
Células adicionales
Adsorción (autóloga / homóloga)
Neutralización
Modificar los hematíes
 Enzimas proteolíticas
 Agentes sulfidrílicos
 AET
Múltiples anticuerpos
anti-Jka , anti-S y anti-P1
Rh
Kell
Kidd
Duffy
Lewis
P
LIS
37º C
SAG
+
0
0
4+
+
+
0
0
4+
+
+
+
0
0
2+
+
0
+
+
0
0
3+
0
+
+
0
+
0
0
4+
+
+
0
0
+
+
0
0
2+
+
0
+
+
+
+
+
0
0
2+
0
0
0
+
+
0
+
+
0
0
2+
0
+
+
0
+
0
+
0
0
0
0
3+
+
0
0
+
+
0
0
+
0
0
0
2+
0
0
0
D C E
c
e
K
k
Jka
Jkb
Fya
Fyb
Lea
Leb
1
0
+
0
+
+
0
+
+
0
+
+
+
2
+
+
0
0
+
0
+
+
0
0
+
3
+
+
0
0
+
+
+
0
+
+
4
+
0
+
+
0
0
+
+
+
5
0
0
+
+
+
0
+
+
6
0
0
0
+
+
0
+
7
0
0
0
+
+
0
8
0
0
0
+
+
9
0
0
0
+
10
0
0
0
+
AC
MNS
M N
S
s
P1
0
+
+
+
+
0
+
+
+
0
+
0
+
+
0
0
+
+
0
+
+
0
+
0
+
+
+
+
0
0
+
0
+
0
+
+
+
+
0
0
+
0
+
+
+
+
0
+
+
0
CC

Múltiples anticuerpos
Células adicionales: anti-Jka, anti-S y descartan anti-P1
Rh
Kell
Kidd
Duffy
Lewis
MNS
P
LIS
37º C
SAG
+
0
0
4+
+
+
0
0
4+
+
+
+
0
0
2+
+
0
+
+
0
0
3+
0
+
+
0
+
0
0
4+
+
+
0
0
+
+
0
0
2+
+
0
+
+
+
+
+
0
0
2+
0
0
0
+
+
0
+
+
0
0
2+
0
+
+
0
+
0
+
0
0
0
0
3+
+
0
0
+
+
0
0
+
0
0
0
2+
0
0
0
D C E
c
e
K
k
Jka
Jkb
Fya
Fyb
Lea
Leb
1
0
+
0
+
+
0
+
+
0
+
+
+
2
+
+
0
0
+
0
+
+
0
0
+
3
+
+
0
0
+
+
+
0
+
+
4
+
0
+
+
0
0
+
+
+
5
0
0
+
+
+
0
+
+
6
0
0
0
+
+
0
+
7
0
0
0
+
+
0
8
0
0
0
+
+
9
0
0
0
+
10
0
0
0
+
M N
S
s
P1
0
+
+
+
+
0
+
+
+
0
+
0
+
+
0
0
+
+
0
+
+
0
+
0
+
+
+
+
0
0
+
0
+
0
+
+
+
+
0
0
+
0
+
+
+
+
0
+
+
0
AC
#1
+
0
0
0
0
3+
#2
0
+
0
0
0
2+
#3
0
0
+
0
0
0
CC


GR autólogos si se sospecha autoAc + aloAc
Gr con
Fenotipo
conocido
Elución Descartar
por calor sobrenadante
Dispensar los GR en 3 tubos:
Muestra
con Ac
múltiples
1
2
3
Para absorciones
adicionales
Centrifugar
Suero
adsorbido
Incubar
Descartar GR
Detección /
Identificación de
Anticuerpos
Prueba Cruzada
Neutralización
Sustancias:
•
•
•
•
P1 (líquido de quiste hidatídico)
Lea y Leb (plasma y saliva)
I (leche materna)
Sda (orina)
** Muchas sustancias neutralizan anticuerpos fríos (IgM);
que pueden enmascarar IgG clinicamente significativa
Múltiples anticuerpos
Anti-K y anti-Fya
Rh
Kell
Kidd
Duffy
Lewis
MNS
P
SAG
CC
+
0

+
+
3+
+
+
0
2+

0
+
0
+
2+

0
+
0
+
0
0

0
+
0
+
0
0
0

0
+
+
+
+
+
+
3+
+
0
+
0
+
+
+
+
2+

0
+
0
0
+
0
0
+
+
0

0
0
+
0
+
+
0
+
0
0

0

D
C
E
c
e
K
k
Jka
Jkb
Fya
Fyb
Lea
Leb
M
N
S
s
P1
1
+
+
0
0
+
0
+
+
0
0
+
+
0
0
+
0
+
2
+
+
0
0
+
+
+
0
+
+
0
0
+
+
+
0
3
+
0
+
+
0
0
+
+
0
+
+
+
0
0
+
4
+
0
+
+
0
0
+
0
+
+
0
0
0
+
5
+
0
+
+
+
0
+
+
0
0
+
0
+
6
0
0
0
+
+
0
+
0
+
0
+
+
7
0
0
0
+
+
+
+
+
0
+
0
8
0
0
0
+
+
0
+
+
0
+
9
+
0
0
+
+
0
+
+
+
10
+
0
0
+
+
0
+
+
+
AC
0
0
Patrón
anti-Fya
Múltiples anticuerpos
Patrón
anti-K
Anti-K y anti-Fya
Rh
Kell
Kidd
Duffy
Lewis
MNS
P
SAG
ENZ
SAG
CC

D
C
E
c
e
K
k
Jka
Jkb
Fya
Fyb
Lea
Leb
M
N
S
s
P1
1
+
+
0
0
+
0
+
+
0
0
+
+
0
0
+
0
+
+
0
0
2
+
+
0
0
+
+
+
0
+
+
0
0
+
+
+
0
+
+
3+
2+
3
+
0
+
+
0
0
+
+
0
+
+
+
0
0
+
+
+
0
2+
0

4
+
0
+
+
0
0
+
0
+
+
0
0
0
+
0
+
0
+
2+
0

5
+
0
+
+
+
0
+
+
0
0
+
0
+
0
+
0
+
0
0
0

6
0
0
0
+
+
0
+
0
+
0
+
+
0
+
0
+
0
0
0
0

7
0
0
0
+
+
+
+
+
0
+
0
0
+
+
+
+
+
+
3+
2+
8
0
0
0
+
+
0
+
+
0
+
+
0
+
0
+
+
+
+
2+
0

9
+
0
0
+
+
0
+
+
+
0
+
0
0
+
0
0
+
+
0
0

10
+
0
0
+
+
0
+
+
+
0
0
+
0
+
+
0
+
0
0
0

0
0

AC
0
Potenciados por enzimas
0
Desnaturalizados por enzimas
Las enzimas remueven el ácido siálico y modifican antígenos
Patrón
anti-Fya
Ac no identificado con panel convencional
Varía c/ ≠ células
Homogénea en fases y medios
Varia c/≠ fases
Efecto de dosis
1 célula +
Ac hacia
Ag Baja
incidencia
Todas las células +
NO
suero vs.
GR
GR neg Ag alta
Incidencia
y GR cordón
GR ENZ,
AET, DTT
cloroquina
Titular
Ac HTLA
SI
KELL, LU,
YT, CO,
DI, SC
adsorción
c/ GR de
≠ fenotipo
Identificar en
sobrenadante
y eluído
NO
SI
Tipificación
Extendida
Inhibición de
hemaglutinación
Ac hacia Ag
alta incidencia
Mezcla de Ac
Compleja
Prueba de antiglobulina indirecta
Positiva
Negativa
Prueba cruzada convencional
Identificar el anticuerpo
R1R1 y anti-E
seleccionar E y c
negativo
R2R2 y anti-C
seleccionar C y e
negativo
Clínicamente no significativo
Clínicamente significativo
Anti-A1, -Kpa,
Anti-M (no activo a 37º C), –N,
Anti-P1, -Lea, -Leb, -Lea+b, -Lua, -I
Anti-D, -C, -c, -E, -e
Anti-K, -k, -Fya, -Fyb ,-Jka, Jkb
Anti-S, -s, U, -M (activo a 37º C)
No es necesario
tipificar las unidades
3) ¿Cómo
identificar los
anticuerpos?
Tipificar las unidades
(aun si en el futuro
la PAI es Negativa)
• Post analítico
Prueba
cruzada
Post-analítico
Unidades necesarias a cruzar
Un anticuerpo
Paciente con un anti-Jka necesita 4 unidades,
¿cuántas unidades necesito cruzar para encontrarlas?
Jk (a+) = 77% Jk (a-) = 23%
Si 23 Jk(a-) ……. 100 donantes
100 x 4
4 Jk (a-) …….
X=
= 17,4
23
Se necesitaran probar 17 o 18 unidades para encontrar 4 Jk(a-)
Post-analítico
Unidades necesarias a cruzar
Anticuerpos múltiples
Por ejemplo: paciente con anti-K y anti-Jka, necesita 2 unidades
compatibles
Jk (a+) = 77% Jk (a-) = 23%
K+ = 9% K- = 91%
Jk(a-) (0.23) x K- (0.91) = 0.20 Jk(a-) y K20% de los individuos son Jk(a-) KSe necesitan 10 donantes al azar para encontrar 2 compatibles
Identificación de anticuerpos
irregulares
1) ¿Cuándo hay que identificar
los anticuerpos?
• PAI+
• Prueba Cruzada +
2) ¿Para que sirve identificar
anticuerpos?
• Significado clínico
• Ac adicionales
3) ¿Cómo
identificar los
anticuerpos?
• Pre analítico
Antecedentes
• Analítico
Exclusión / “regla de 3”
• Post analítico
Cruzar y tipificar GR
Gracias…
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