UNIVERSIDAD AUTONOMA DE CHIHUAHUA.
FACULTAD DE CIENCIAS QUIMICAS.
MICROBIOLOGÍA DE ALIMENTOS.
TÉCNICAS DE ANÁLISIS MICROBIOLÓGICO
EN FRUTAS Y HORTALIZAS FRESCAS
Dr. Iván Salmerón.
Nolbertha Corral Soriano
Erwinia carotovora.
 Pertenece a la familia de las Enterobacteriaceae.
 Siendo estas del grupo de los coliformes.
 NOM-112-SSA1-1994
Bienes y Servicios. Determinación
bacterias coliformes. Técnica del numero mas probable (NMP)
de
Densidad esperada es 1
bacteria X 10ml de
liquido o X g de alimento
solido
Proporciona una estimación
estadística de la densidad microbiana
presente en los tubos con crecimiento
positivo
FUNDAMENTO.
Bacterias coliformes
Fermentan la lactosa
Incubadas a 35 ± 1°C durante 24 a 48 horas.
Resultando una producción de ácidos y gas el cual es
manifestado en forma de turbidez.
Bacilos
Gram
negativos,
no
esporulados, aerobios o anaerobios
facultativos.
REACTIVOS.
 Solución reguladora de fosfatos.
 Caldo lactosado
Preparación de muestra
Medio selectivo de mayor concentración.
 Caldo lauril sulfato triptosa
 Caldo lactosa bilis verde brillante
Medio selectivo de enriquecimiento.
Medio confirmativo.
PROCEDIMIENTO.
PRUEBA PRESUNTIVA.
10 ml de la dilución primaria inicial (NOM- 110)
10 ml de Caldo lactosado.
Realizar diluciones según se necesite.
1ml de la dilución primaria inicial NOM -110
10 ml de Caldo lauril sulfato triptosa.
Incubar a 35 ± 0,5 °C
por 24 ± 2 horas
PROCEDIMIENTO.
PRUEBA CONFIRMATIVA.
Después del tiempo de incubación de la prueba presuntiva
10 ml de caldo lactosa bilis verde brillante.
Tubos con presencia de gas
Incubar a 35 ± 0,5 °C por 24
± 2 horas
Dilució
n 10-1
Dilució
n 10-2
Dilució
n 10-3
Índice del
NMP/100
ml
0
0
1
3
0
1
0
3
1
0
0
4
1
0
1
7
1
1
0
7
1
1
1
11
1
2
0
11
2
0
0
9
2
0
1
14
2
1
0
15
Los resultados se expresan como
numero de bacterias /g o ml
 De los tubos positivos, se puede sembrar en el
agar selectivo MacConkey e incubar a 37 ºC
por 24 h.
 Este medio se utiliza para el aislamiento de
bacilos Gram negativos, aerobios y anaerobios
facultativos.
 Todas
las
especies
de
Enterobacteriaceae en este agar.
la
familia
FUNDAMENTO DEL AGAR.
Peptona
Desarrollo de los microorganismos.
Lactosa
Hidrato fermentable
Sales biliares y cristal violeta
Inhibidores de Gram positivos
Agar MacConkey
Pequeñas colonias
de color rojo o rosa
profundo
Agar MacConkey
con Erwinia carotovora
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