Procariote
Eucariote
(sin membranas internas)
(con membranas internas)
Bacteria
Célula animal
Célula Vegetal
Herramientas clave en el estudio de la biología celular:
- microscopía óptica
- microscopía electrónica: alta resolución, técnicas de fijación,
histoquímica de membranas
- genética de levaduras:
(mutantes)
- bioquímica:
reconstitución in vitro e identificación de
componentes involucrados
- inmuno-histoquímica
generación de anticuerpos
- biología molecular
- microscopía fluorescencia
- proteína verde fluorescente (GFP)
- microscopía confocal, FRAP (fluorescence recovery after bleaching)
- cámaras de alta resolución …...
Núcleo (esquema)
Cytoplasm
Nucleus
Poro
Nuclear
Función: Regulación
- Expresión genes
- Replicación DNA
- Transducción de señales
…..
COMPARTIMENTOS DEL NUCLEO
Intercromatina:
- proteínas y RNP’s
- nuclear speckles (spliceosome)
- Cajal bodies (snRNP biogenesis)
- PML nuclear bodies (transcriptional
regulators)
...
Clase I: Lámina nuclear
Tipo filamentos intermedios
Clase II: Contacto NE con
lámina y cromatina
Clase III: Transporte
núcleo-citoplasma
Clase IV: Asociación DNA
PORO NUCLEAR
Función: Transporte núcleo-citoplásmico
Transporte núcleo-citoplásmico
(bi-direccional)
Pasivo:
5,000 MW are freely diffusable
17,000 MW-- take 2 min to establish equilibrium
44,000 MW--take 30 min to establish equilibrium
60,000 MW--cannot move in by diffusion
“Facilitado”:
Rápido y selectivo
Regulado
40-60kDA-MDa
Proteínas de transcripción, replicación, estructurales
Ribosomas ensamblados
tRNA’s….
Modelos de Funcionamiento del
Complejo del Poro Nuclear
Brownian motion
Selective phase model
Oily-Spaghetti
Transporte núcleo-citoplásmico
Proteínas
Karioferinas
Importina a / Importina b
Exportina 1 (crm1)
(Ran-GTP binding proteins)
NES (Nuclear Export Signal)
NLS (Nuclear Localization Signal)
Ran-GTP / Ran-GDP
(Núcleo / Citoplasma)
RanGAP (Citoplasma)
(GTPase Activating Protein)
RanGEF o RCC1 (Núcleo)
(Guanine Nucleotide
Exchange Factor)
Señales de Transporte Nucleo-citoplásmico
(Proteínas)
B: Básico (K o R)
J: Hidrofílico
Z: Hidrofóbico
X: Cualquiera
M9: hnRNP A1
Importación:
Proteínas a Núcleo
5
4
Importinas a y b
3
6
2
8
7
1
Exportación: Proteinas a Citoplasma.
Exportina 1 (crm1)
Ran-GTP Gradient in Interphase
(Ran-GTP cycle)
Transporte Nucleo-citoplásmico
Exportación de RNA’s (Crm1)
Transporte Nucleo-citoplásmico
Exportación de mRNA’s
ORGANIZACION DE CROMATINA
(dinámico)
Heterocromatina
- condensada a lo largo del
Ciclo celular
- estructura compacta inanccesible a
factores de modificación de DNA
- no genes
- NO transcripción
- periferia núcleo (cromosomas con
baja densidad genes)
Eucromatina
- no condensada en interfase
- transcripcción activa
- interior del núcleo (cromosomas con
alta densidad genes)
Localización de factores de regulación?
ACTIVIDAD TRANSCRIPCIONAL
SPLICING
splicing
snRNA
Ciclo Celular en Células Diploides
(mitosis en células mamífero)
Membrana Nuclear
se fragmenta
Estructura de dos
membranas nucleares
Mitosis
~1 hora
Interfase (4n)
~3 horas
~16 horas
Interfase (2n)
~5 horas
(Síntesis DNA)
~7 horas
Go
Ensamblaje y Desensamblaje de la Membrana Nuclear
(Mitosis)
Importin -Exportina?
Mitosis abierta vs cerrada
Descargar

Transporte núcleo