Detección de Vibrio cholerae en muestras
ambientales. Rol del Departamento Salud
Ambiental.
BQ. María Cristina Martínez
Sección Microbiología de Alimentos y Aguas
Subdepartamento de Alimentos y Nutrición
INSTITUTO DE SALUD PÚBLICA DE CHILE
Es el laboratorio nacional y de referencia en los
campos de la microbiología, inmunología, bromatología,
farmacología, imagenología, radioterapia, bancos de
sangre, laboratorio clínico, contaminación ambiental y
salud ocupacional. Como Institución pública, también
realiza funciones de control, supervisión, e investigación.
(Ley de Autoridad Sanitaria Nº 19.937, Art. 35)
INSTITUTO DE SALUD PÚBLICA DE CHILE
Departamento Control Nacional
Departamento Laboratorio Biomédico Nacional
Departamento de Salud Ambiental
Departamento Salud Ocupacional
Departamento Administración y Finanzas
DEPARTAMENTO SALUD AMBIENTAL
Realizar análisis químicos,
microbiológicos, toxicológicos y otros de
muestras de alimentos, aguas y otras
sustancias, así como de elementos
contaminantes.
DEPARTAMENTO SALUD AMBIENTAL
Efectuar investigación aplicada en
técnicas relativas a las materias de su
competencia, para su perfeccionamiento
y difusión.
Realizar actividades de apoyo a la
vigilancia epidemiológica y a programas
ministeriales
DEPARTAMENTO SALUD AMBIENTAL
Referencia, normalizador y supervisor de
la Red de Laboratorios de Salud Pública
reconocidos, públicos y privados, en
materia de alimentos y medio ambiente.
Dpto. Salud Ambiental
JEFATURA DEPTO
SALUD AMBIENTAL
Coordinador de
Gestión
Coordinador de
Calidad
U. Coordinación de
Lab. Ambientales
U. de Plaguicidas
y Desinfectantes
U. Fiscalización de
Lab. Ambientales
Subdepto.
Producción
Sección
Aguas
Sección
CPAL
Secretaria
Subdepto.
Alimentos y
Nutrición
Secc. Química
de Alimentos y
Nutrición
Secc.
Microbiología de
Alimentos
Subdepto. Metrología
y Desarrollo
Tecnológico
Secc. Metrología
de Ambiente y
Alimentos
Secc.
Biotecnología
Subdepto. del
Ambiente
Secc.
Química
Ambiental
SECCION MICROBIOLOGÍA
ALIMENTOS Y AGUAS
•
•
Actualización de métodos para la detección de
microorganismos patógenos e indicadores de higiene
en alimentos y aguas.
Transferencia tecnológica a la red pública de
laboratorios ambientales
Red pública de Laboratorios del Ambiente
Arica
Arica
Iquique
Iquique
Antofagasta
Antofagasta
Atacama
Copiapó
Coquimbo
Coquimbo
Metropolitana
Santiago
Valparaíso
Valparaíso, Viña del Mar, San Felipe
O´Higgins
Rancagua
Maule
Talca
Bio Bio
Concepción, Chillán , Los Angeles
Araucanía
Temuco
Los Ríos
Valdivia
Los Lagos
Puerto Montt, Osorno
Aysen
Aysen
Magallanes
Punta Arenas
TOTAL
20
VIGILANCIA AMBIENTAL
RED DE LABORATORIOS PUBLICOS
• De los 20 laboratorios, 19 tienen implementado el método de
detección de Vibrio cholerae, 13 realizan análisis de muestras para la
vigilancia de cólera en forma rutinaria.
• En promedio tienen una capacidad analítica de 3-5 muestras
semanales.
• Se encuentran en distintas etapas de implementación de la NCh
17025
• De acuerdo al Plan nacional de preparación para un eventual brote de
cólera, se destinaron recursos para la compra de insumo y
equipamiento, con el objeto de retomar la vigilancia ambiental de
cólera en todos los laboratorios.
VIGILANCIA AMBIENTAL
METODOS DE ANALISIS DE Vibrio cholerae
1. Aguas Servidas (altamente contaminadas):
Detección de Vibrio cholerae por Tórula de Moore
2.- Aguas Claras sin mayor turbiedad o sedimentos (agua de mar, agua
de riego, agua consumo humano)
Método de Filtración por Membrana
3.- Alimentos (moluscos bivalvos, verduras):
Detección de Vibrio cholerae en 25 g
Referencias: CDC; BAM FDA; Standard Methods
http://www.ispch.cl/
METODO TORULA MOORE
Muestras Agua Servida
Altamente contaminada
Exposición 24-48 horas
TRASLADO < 6 HORAS AL
LABORATORIO
Enriquecimiento
Agua Peptonada Alcalina
(ph 8.5)
crítico
METODO FILTRACION POR MEMBRANA
Muestras agua sin mayor
turbiedad o sedimento
TRASLADO < 6 HORAS AL
LABORATORIO
Filtrar por 0.22-0.45
200-300 ml
Enriquecimiento
Agua Peptonada Alcalina
(ph 8.5)
crítico
DETECCION EN ALIMENTOS
TRASLADO < 24 HORAS
AL LABORATORIO
25 g alimentos,
moluscos, verduras
Enriquecimiento
Agua Peptonada
Alcalina (ph 8.5)
PROCESO ANALÍTICO
Enriquecimiento
Agua Peptonada Alcalina (ph 8.5)
6-8 HORAS
crítico
AISLAMIENTO AGAR SELECTIVO TCBS
Colonias amarillas con bordes lisos, 2-3 mm
ligeramente aplanadas en el centro
Ausencia
Vibrio cholerae
(-)
PRUEBAS BIOQUIMICAS
(+)
Serología
(-)
(+)
Presuntivo
Vibrio cholerae O1
Vibrio cholerae NO O1
Envío laboratorio de referencia
AISLAMIENTO DE TORULA MOORE
VIGILANCIA AMBIENTAL COLERA RM-2010
TIPO MUESTRA
CANT.
Torula Moore: Planta tratamiento aguas aeropuerto AMB
14
Torula Moore: La Farfana
4
Tórula Moore: El Trebal
4
Canales de regadío (10)
20
Mariscos terminal pesquero
110
Hortalizas predios agrícolas
23
TOTAL
Resultados: Ausencia Vibrio cholerae O1
Fuente: SEREMI Salud Región Metropolitana
175
VIGILANCIA AMBIENTAL
BASE DE DATOS COLERA
Se creó base de datos on line para ingreso de
muestras y resultados del monitoreo ambiental,
que realicen los Laboratorios Ambientales de las
SEREMIs de Salud.
OBJETIVO: Estandarizar la información de puntos
de muestreo y resultados de análisis a nivel
nacional y regional.
DESARROLLO TECNOLOGICO
METODOS DE DETECCION MOLECULARES
1. Agua: Implementación Método FDA, NMP en aguas
concentradas para Detección de gen toxigénico de Vibrio
cholerae en los tubos del enriquecido, directamente.
2.- Moluscos bivalvos: BAX Vibrio (qPCR tiempo real).
Muestreo de 5 muestras 2 veces al mes, desde Diciembre
2010 a Marzo 2011, para detección de Vibrio cholerae,
(Puerto Montt).
COMENTARIO FINAL
El desafío propuesto es coordinar esfuerzos para
establecer una red de laboratorios públicos y
privados que permita compartir conocimiento y
tecnología y enfrentar, de manera conjunta,
eventuales emergencias sanitarias en nuestro
país.
GRACIAS
[email protected]
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