EL ADN
Sus aplicaciones en Medicina Forense
Esperanza López Hidalgo.
Médico Forense.
IML de Málaga.
APLICACIONES



Investigación de la paternidad
Identificación criminal
Identificación no criminal
Alec Jeffreys 1985
CARACTERISTICAS DEL
ADN




Unico
Mismo en todas las células
Estable
Hereditario
ESTRUCTURA



Dos largas cadenas de nucleótidos
unidas formando una doble hélice
En el núcleo de la célula, en los
cromosomas
Cariotipo humano 46 cromosomas
FUNDAMENTO de la
aplicación del ADN en MF
Polimorfismo
Fragmento de ADN presentes en todos los
individuos pero que son altamente
variables
Mediante el análisis de varias regiones
polimórficas, la probabilidad de que dos
individuos sean iguales es prácticamente
nula. Excepción gemelos univitelinos
Tipos de Polimorfismos

Modificación de un solo nucleótido
(SNPs)

P. de Longitud (VNTR). Secuencia de
nucleótidos repetidos en tandem
a)
Minisatélites (MVR), secuencias 30 pb
a)
Microsatélites (STR), 2 a 6 pb,
normalmente 4, ATTCATTC... Homo o
heterocigótico
TIPOS DE ADN



ADN nuclear
ADN mitocondrial
Polimorfismo del cromosoma Y
ADN mitocondrial

Se encuentra en las mitocondrias

Herencia por vía materna

Utilidades
ADN deteriorado
Células carentes de núcleo
Linajes maternos
a)
b)
c)
P. Cromosoma Y




Filiación en ausencia de progenitor
Linajes por línea paterna
Delitos sexuales
Identificación de sexo en
catástrofes
Inconveniente, todos los individuos
de la línea paterna comparten la
misma información.
METODO DE ANALISIS

Hibridación con sondas

Reacción en cadena de la
polimerasa PCR
HIBRIDACION CON
SONDAS
Sonda, fragmento monocatenario de ADN
con una secuencia conocida que se une
a un fragmento complementario de ADN.
Sondas marcadas radiactivamente o con
un producto quimioluminescente.
Se pone en contacto con la muestra y se
separan los fragmentos según su
longitud.
Wyman y White, 1980.
TIPOS DE SONDAS
Mono-locus (SLP): Específicas para una
región de un cromosoma.
1 o 2 bandas, homo o heterocigótico.
Multi-locus (MLP): Hibridan secuencias
minisatélite, 33 pb, en varios locus de
diferentes cromosomas.
Patrón de múltiples bandas, huella
genética.
Ventajas de las SLP
-
Mas específicas
Exclusivas del ADN humano
Menor cantidad de muestra, 20 a
100 ng de ADN, no
necesariamente en buenas
condiciones
TECNICA DE LA PCR
Es la de mayor aplicación.
Enzima Taq polimerasa se van uniendo
de forma complementaria fragmentos de
ADN delimitados con sondas, primers.
Repetición cíclica del proceso permite
obtener múltiples copias del fragmento
de ADN.
UTILIDAD, escasa cantidad de ADN o
degradado.
MUESTRAS
Cualquier célula o tejido vivo o
posmortem.
-
Sangre, manchas.
Células, frotis.
Tejidos, piel, huesos.
Pelos.
Instrucciones básicas
Sangre con anticoagulante
Secado al aire
Muestras testigo
Muestras indubitadas
Máxima higiene
Envasar los indicios por separado
Etiquetado e identificación
Filiación de quienes intervienen en la
investigación
INTERPRETACION DE
RESULTADOS
Se expresa mediante un valor de
probabilidad basado en el
teorema de Bayes.
Cálculo de la probabilidad en función
de la frecuencia en la población
de los perfiles analizados.
PROBABILIDAD DE
PATERNIDAD
Si no se produce la exclusión directa.
PP = ( X/X+Y).100
X = probabilidad de transmitir el rasgo al
hijo
Y = frecuencia del marcador en la
población
INVESTIGACION
CRIMINAL
Si los perfiles analizados coinciden se
analiza la frecuencia de los
polimorfismos analizados en la
población general.
Las combinaciones de los polimorfismos
que se analizan en la actualidad
permiten determinar una probabilidad
de repetición al azar de hasta 1/ 1015
Si la frecuencia fuera de 1%
FALACIA DEL FISCAL: SI solo 1 de cada
100 personas tendrían ese perfil, el
acusado tiene el 99% de posibilidades
FALACIA DE LA DEFENSA: En una
población de 100.000 personas 1000
tendrían ese perfil, el acusado y 999
personas mas podrían ser culpables
Los dos son razonamientos falsos,
aplicando el análisis Bayesiano,
obtenemos la probabilidad, con
lo que se denomina RAZON DE
VEROSIMILITUD, que sería el
razonamiento correcto
Frecuencia 1%
Probabilidad de ser culpable = 1
Probabilidad de no ser culpable = 1/100 =
0.01
RV = 1/0.01 = 100
El sospechoso es 100 veces mas probable
de ser culpable que otra persona
escogida al azar
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