Electroforesis en gel
Por:
Christian Grinberg Menini
Gonzalo García Rellihan
Electroforesis en gel
•
Se implementó por primera vez en 1937,
pero su importancia aumentó en los años
cincuenta, cuando se la empezó a utilizar
con otros fines.
•
Método de laboratorio, en el cual se
utiliza una corriente eléctrica controlada,
cuyo fin es separar bio-moléculas según su
tamaño y carga eléctrica a través de una
matriz gelatinosa.
¿Cómo es el proceso de
electroforesis en gel?
• Explicación on – line:
• http://biomodel.uah.es/biomodelmisc/anim/elfo/electrof2.html
Análisis del ADN
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La electroforesis en gel, es constantemente utilizada para análisis del
ADN.
El análisis consiste en hacer un Southern Blotting (o "Southern blot"
que es un método de biología molecular que sirve para verificar si una
determinada secuencia de ADN está o no presente en una muestra de
ADN analizada).
En primer lugar el ADN que se va a analizar se separa de otros
materiales. A continuación, debe cortarse en piezas de diferentes
tamaños usando enzimas de restricción, que son proteínas que cortan
el ADN sin dañar las bases. las piezas son clasificadas por tamaño
mediante electroforesis en gel. Las piezas con carga positiva se van a
la parte superior. El ADN que tiene una ligera carga negativa natural es
atraído hacia el fondo. Las piezas más pequeñas se mueven más
rápidamente a través del gel, por lo que será aún más hacia la parte
inferior de las piezas grandes. Al separar las piezas por tamaño, los
más altos se mantienen arriba y los más pequeños debajo. Luego por
calor o solución alcalina, se aplica gel con el fin de desnaturalizar el
ADN y se separa en fragmentos individuales. Una vez realizado esto el
ADN esta ahora listo para ser analizados utilizando una sonda
radiactiva de reacción de hibridación.
• Luego de
esto, se
pueden
comparar dos
muestras de
ADN para
comprobar si
tienen la
misma
secuencia, o
algunas
cosas en
común. A
continuación
se muestra
un ejemplo:
• Como se puede ver en el ejemplo mostrado
anteriormente, el analisis de ADN puede ser
utilizado para investigaciones forenses. Por
ejemplo, en el caso un asesinato, si se
encuentra alguna muestra de ADN en algún
lugar de la escena del crimen, este puede ser
analizado y comparado con el de todos los
posibles sospechosos. De esta manera se
puede encontrar al culpable, por lo que la
electroforesis en gel es muy útil para este
tipo de casos. Lo mismo se da en el caso de
una violación. Si se encuentran restos de
esperma del violador en la chica, estos se
pueden analizar de una forma muy precisa
gracias a la electroforesis en gel, para así
encontrar al verdadero culpable.
Pruebas de paternidad
• De la misma manera que el análisis de ADN
por electroforesis en gel sirve para ayudar en
investigaciones forenses, también sirve para
realizar pruebas de paternidad. Esto se hace
utilizando el mismo procedimiento utilizado
en las investigaciones forenses, y tiene un
99,9% de exactitud.
• Lo único necesario para esto es tener una
muestra de ADN del posible padre o madre, y
una del hijo. Estas luego se comparan, y se
comprueba la relación que existe entre
ambas.
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