APOYO LABORATORIO
ESPECIALIDAD OBSTETRICIA
DR. HERIBERTO ARANEDA
PROFESOR ASOCIADO
2006
GONADOTROFINA CORIONICA
• Glicoproteína 40 kD
• 2 subunidades: a 92 aa Cr 6
b 24 aa Cr 19 única y crítica para la actividad
biológica.
• Cadena de Carbohidratos 1/3 PM
• Vida media 24 hrs.
• Sinciciotrofoblasto
• Peak 8-12 sem. 100-300x103 mUI/ml
• Niveles se duplican entre 48 y 60 horas.
• 50-200 mUI/mL 1 día atraso
• 20x103 mUI/ml hasta el término.
• niveles no detectables 11-16 días post parto
• 6 Nick o Isoformas
• Interacciones entre esteroides sexuales,
citoquinas, factores liberadores y factores de
crecimiento.
GONADOTROFINA CORIONICA
• Niveles detectables en suero a partir
del octavo día de la fecundación
• En el 85% de los embarazos no viables,
incremento menor 70%
• Entre 1000- 2000 mUI/ml el ultrasonido
endovaginal debería identificar un saco
gestacional intrauterino
• Entre de 6000-8000 mUI/ml el ultrasonido
transabdominal debería identificar un
saco gestacional intrauterino
• Tipo de ensayo : ELISA
• Sensibilidad 97 % Especific. 100%
¿Cuales son las indicaciones
más frecuentes b-HCG
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
embarazo precoz.
embarazo ectópico.
síntoma de aborto.
aborto
enf. trofoblástica.
rpm
preeclampsia
Tu tracto gen masc
Ca vegiga
trisomía 21-18
¿Cuales son algunas de las
funciones de la b-HGC?
• inhibir la ovulación
• mantener el Cuerpo Lúteo hasta las 7
sem.
• estimular la esteroideogénesis
• acción tirotrófica
• diferenciación sexual.
Amniocentesis : Indicaciones
• Primer trimestre:
Diagnóstico prenatal de
defectos congénitos
• Tercer trimestre :
Madurez pulmonar fetal,
edad gestacional,
bienestar fetal
Edad gestacional
• Tiempo
• Variable
Independiente,
no modificable
Madurez fetal
• Grado de desarrollo y
diferenciación de un órgano
fetal en particular o del
organismo fetal en general
• Se asocia con la capacidad
del RN para enfrentar el
ambiente extrauterino sin
apoyo adicional.
Bienestar fetal
• Ausencia de noxa,
injuria o daño fetal
¿Cómo comunica el feto su
bienestar ?
• LCF
• crecimiento y
desarrollo
• morfología
• variaciones en el
volúmen de L.A
• meconio
• sangre
• inflamación
Ruptura prematura de membranas
Evento que ocurre en el 10% de los embarazos
80% despues de las 37 semanas
30 a 50 % infección ovular
– muestra: fondo de saco vaginal
– pH 7,04 o mayor(nitrazina)
– cristalización en hoja de helecho(aác)
– detección de células naranjas (Ferning test)
– Detección de leucocitos(> 50 leuc/mm3)
– T. Gram (bacterias)
Aspecto Físico L.A.
Varía según la E.G. y la madurez fetal
•
•
•
•
Color
Opalescencia
Viscosidad
Vernix
Presencia de meconio en el liquido amniótico
y su relación con el grado de madurez fetal
Madurez Fetal
Meconio
< 37
SI
NO
Total
≥ 37
839(39 %)
1.312 (61%)
Total
2.151
(7%)
( 24.4 %)
( 12.4 % )
11.128 (73 %)
4.065 (27 %)
15.193
( 93 %)
( 75.6 %)
11.967 (69 %)
5.377 (31 %)
p < 0.01
( 87.6 %)
17.344
CITOLOGIA DE L.A.
(TEST DE BROSENS)
Madurez epidérmica fetal
• 1 gota de L.A.
• 1 gota azúl de nilo
Parabasal
I
Intermedia
II
Cornificada
III
Naranja
IV
Células epidermicas fetales
Células Epidermicas Fetales
%
I
IV
20
20
34
37
Edad gestacional (sem)
Interpretación
test de Brossens(citología)
Edad gestacional
Células tipo IV
• menor 20%
• 20-60%
• mayor 60 %,
=
=
=
menor 37 Sem
37 a 40 semanas
> de 40 semanas.
Correlación entre la estimación de edad gestacional por test de
Brossens vs edad gestacional pediátrica en 460 casos
n = 460
p = 0,85
c = 0,92
1
28 6,1 %
81
± 3 sem
100 %
± 2 sem
99.3
±1sem ±0 sem
86,2 % 50 %
17,5
228
88
32 7,0 %
2
19,2 %
49.5 %
EDAD GESTACIONAL PEDIATRICA
MADUREZ FETAL POR TEST DE BROSSENS VS MADUREZ DEL R.N.
DENTRO DE LA SEMANA DE INTERRUPCIÓN DEL EMBARAZO
EDAD GESTACIONAL BROSSENS
< 37
< 37
206
≥ 37
≥ 37
0
206
3
251
254
209
251
460
SENSIBILIDAD: 100 % VPP: 98.3 %
ESPECIFICIDAD: 98.8 % VPN: 100 %
p>0,8
Surfactante alveolar
Vertido al L.A. por secreciones traqueobronquiales en forma de esferas
• Sustancia Compleja
• Neumocitos tipo II
• Fosfolípidos, Apoproteínas,
Glúcidos
• Reduce TS agua alveolar
• Cuerpos laminillares o
lamelares.
Test de Clements
Prueba rápida para la detección de madurez pulmonar fetal
• Detección grado de
madurez pulmonar
• Surfactante/etanol
• Sensibilidad 99-100%
• Especificidad 50%
TEST DE CLEMENTS
Eliminar
1 mL
Líquido Amniótico
Suero Fisiológico
Dilución
Etanol 95%
2 mL
------1/1
1 mL
Interpretación (% ) 0 - 25
IP/MPR
-----1 mL
½
1 mL
50
MP
------1 mL
¼
1 mL
75
MP
------1 mL
1/8
1 mL
100
MP
Test de Clements
Negativo
Positivo
MADUREZ PULMONAR FETAL POR TEST DE CLEMENTS VS
DISTRESS RESPIRATORIO DEL RECIÉN NACIDO
DISTRESS RESPIRATORIO
TEST DE CLEMENTS
NEGATIVO POSITIVO
NO
49
220
269
SI
47
0
47
96
220
316
SENSIBILIDAD: 100 % VPP: 81.7 %
ESPECIFICIDAD: 48,5 % VPN: 100 %
p = < 0.001
TAP Test
• Apo I, II, III, IV
• Proteínas reducen la TS
• Concentración en L.A.
inversamente proporcional a la
madurez
• Sensibilidad 98-100%
• Especificidad 60%
TAP TEST
• TEST RAPIDO PARA
MADUREZ PULMONAR
• DETECCION DE
APOPROTEINAS
• SENSIBILIDAD 99-100 %
• ESPECIFICIDAD 60-70 %
SENS: 100 %
ESP: 75 %
Eter Dietílico 1.5 ml
HCl 1 gota
L.A. 1 ml
Madurez pulmonar: Menos de 5 burbujas en la interfase acuosa/etérea
Socol/89
BILIRRUBINA
450 nm
DELTA
20
DELTA A 450 nm
>0.01
0.00
35
E.G. (Sem.)
MADUREZ FETAL
inmaduro
maduro
FOSFATIDIL GLICEROL
•
•
•
•
•
MADUREZ PULMONAR FETAL
FOSFOLIPIDO ACIDO
APARICION TARDIA
ESTABILIZA LA PC
CROMATOGRAFIA
PG
L
S
SENSIBILIDAD: 100 %
ESPECIFICIDAD: 95 %
CUNNINGHAM/78
M S
MADUREZ PULMONAR FETAL POR FOFATIDIL GLICEROL VS
DISTRESS RESPIRATORIO DEL RECIÉN NACIDO
DISTRESS RESPIRATORIO
FOSFATIDIL GLICEROL
NEGATIVO POSITIVO
NO
2
220
222
SI
94
0
94
96
220
316
SENSIBILIDAD: 100 % VPP: 100 %
ESPECIFICIDAD: 97.9 % VPN: 99 %
p = < 0.0001
GENERALIDADES DE LAS
CITOQUINAS
La primera Interleuquina descubierta fue
la IL-2 por Morgan 1976,
Se las denominó: Linfoquinas, Monoquinas,
Interleuquinas y Citoquinas.
Seigel 1984 identificó el locus de la IL-2 en el
cromosoma 4 brazo q
A fines de la década de los 80 comenzaron las
primeras mediciones de Citoquinas en pacientes
sépticos (Vilcec 1987, Beutler 1987, Dinarello 1988)
En 1990 se usó en modelos animales un bloqueador del
receptor de las citoquinas para antagonizar la respuesta
(receptor soluble)
CARACTERISTICAS DE LAS
CITOQUINAS
• Las citoquinas son proteínas de bajo peso molecular y con
vida media breve.
• Son sintetizadas y liberadas en respuesta a un estímulo
inflamatorio por células inmunocompetentes.
• Son precoces indicadores de inflamación y sepsis.
• Tienen efectos redundantes.
• La administración sub-letal de LPS en animales de
experimentación, induce a un estado de shock similar a la
sepsis en humanos.
• Circulan en concentraciones muy bajas: nanogramos 10-9
y picogramos 10-12
FUNCIONES MAS RELEVANTES DE
LAS CITOQUINAS
•Moduladores de la respuesta inmune, estimulan la
síntesis de anticuerpos.
•Diferenciación, maduración y activación de
las células del sistema inmunitario
•Algunas con acción pro inflamatoria y otras con
acción anti inflamatoria
•Funciones efectoras directas (quimiotaxis; vaso
dilatación, lisis de tejidos, necrosis, apoptosis.)
Oberholzer A Shock 2000 Sep;14(3):253-7
ACTIVACION SISTEMA
MONOCITO-MACROFAGO
POR LAS CITOQUINAS
• Cualquier injuria (LPS, endotoxina bacteria,
virus,protozoo, celula alterada) gatilla la
respuesta del huésped
• Sistema eficiente, inespecífico, sin memoria
inmunológica
• Inicia síntesis de cascada mediadores de
inflamación: (TNFa, IL-1a, IL-6)
Estimulación del sistema
Inmunocompetente
IL-1a
IL-1aR
LPS
Linfocito
CELULA T T
MACROFAGO
MACROFAGO
CMH
IL-b
Receptor
IL-bR
WAKSMAN BH Biology of linphokines 1979;585-616
TNF
IL-6
CASCADA DE CITOQUINAS EN SEPSIS
Estímulo LPS
TNF
IL-1
IL-6
NIVELES PLASMATICOS
LPS
Estímulo TNF
0
1
2
3
4
5
Hrs. Post Inyección de LPS
TNF
IL-1
IL-6
1
2
3
4
5
Hrs. Post Inyección de TNF
BEUTLER B. Annual Review of Immunology 1988;7:625-655
ESTRUCTURA DE LAS CITOQUINAS
COOH
b3
NH2
b2
b1
CITOQUINAS
ANTI-INFLAMATORIAS
IL-4
IL-10
IL-12
G-CSF
GM-CSF
TGF-b
PRO-INFLAMATORIAS
TNF
IL-1a,b
IL-6
IL-8
IFNg
PROCALCITONINA
PAF
INDICACIÓN CITOQUINAS
Diagnóstico de infección con inflamación sistémica
Monitoreo de la terapia en el curso de infección
bacteriana severa
Diagnóstico diferencial de enfermedades
inflamatorias y fiebre de origen desconocido
Manejo de enfermedades inflamatorias de origen
conocido
Pronóstico en el manejo clínico de sepsis, shock
séptico y SIRS
Acciones de la Interleuquina-6
• Estimula síntesis de TNFa e IL-1a
• Modulador de la respuesta mediada por
células (monocitos, macrófagos, neutrófilos
polimorfonucleares)
• Estimula síntesis proteína fase aguda (PCR)
• En casos de patologías severas aumenta
significativamente.
• Factor pronostico de enfermedad infecciosa
grave(sepsis. Shock, meningitis, etc).
Fibronectina fetal
•
•
•
•
•
•
•
Glicoproteína
Hepática, oncofetal
Citotrofoblastica y placentaria
20 semanas
ELISA
50 ng/ml
FDA, ACOG
Clinical management guidelines for ob/gyn 2001;98:909
¿El screening para fibronectina
oncofetal predice parto de
pretérmino?
• Meta-análisis Goldenberg ,OSU,
Birmingham
• 27 estudios 1992-2000
• 3076 pacientes
• >50 ng/ml
• Parto < 34 semanas
• Sensibilidad 61%, Especificidad 93%
Goldenberg R, Am J Obstet Gynecol 2000;182:636-643
FIBRONECTINA (50 ng/mL)
TABLA 2: PARTO PREMATURO Y FIBRONECTINA
PARTO PREMATURO
SI
POSITIVA
NEGATIVA
NO
10 / 2,5
3 / 10,4
13
SENSIBILIDAD :
7 / 2,5
17
66 / 58,5
69
73
86
77 %
ESPECIFIDAD : 90 %
VPP
:
59 %
VPN
: 90 %
METANÁLISIS
Autor
Lockwood
Morrison
Iams
Lockwood
Nageotte
Hellemans
Leitich
Iams
Araneda
Fibronectina en pacientes con
factores de riesgo para PP
Año
1991
1993
1994
1994
1995
1996
1999
2001
2005
n
Sens
Esp
VPP VPN
(%)
(%)
(%)
(%)
60
28
192
429
87
133
136
221
87
82
90
44
68
93
60
89
84
77
83
72
86
80
52
85
86
85
90
n/d
64
60
30
46
25
64
63
59
n/d
93
76
95
94
96
95
97
96
1373
76
80
50
92
Fig. 2 FIBRONECTINA CERVICO VAGINAL EN PARTO
PREMATURO
p = < 0,01
PP
FIBRONECTINA (ng/mL)
1000
SPP
750
653(21 - 1000)
500
250
0
14 (3 - 62)
73
13
PARTO PREMATURO
Descargar

APOYO LABORATORIO ESPECIALIDAD OBSTETRICIA