Extracción y separación de pigmentos vegetales por
cromatografía
I.E.S. “Ategua” (Castro de Río),I.E.S.”Infantas Elena y Cristina” (Puente
Genil),I.E.S.”Juan de la Cierva” (Puente Genil), I.E.S”.Profesor Andrés Bojollo”
(Puente Genil) I.E.S. “Nuevo Escala” (Rute)
Plantas verdes
PIGMENTOS
LUZ
CLOROFILAS
FOTOSÍNTESIS
ANTOCIANOS
CAROTENOS
XANTOFILAS
ayb
SOLUBILIDAD
La energía que necesitan los organismos
fotosintéticos proceden de la luz. Esta es captada
por los pigmentos que poseen todas las plantas .La
sustancia encargada de esto es la clorofila en sus
diversos tipos, como son la clorofila A y clorofila B.
Hay otros pigmentos presentes en los vegetales que
también colaboran en la captación de la energía
como son los carotenos, xantofilas, antocianos etc.
Hay varios métodos que nos permiten la separación
e identificación de estos pigmentos.
Todas las técnicas se basan en la diferencia de
solubilidad en distintos disolventes Dentro de los
métodos de separación de mezclas homogéneas
(disoluciones) vamos a usar una técnica sencilla
como es la cromatografía en papel .Se basa en el
arrastre que ejerce el disolvente sobre los distintos
compuestos lo que hace que estos se desplacen
con distinta velocidad, separándose poco a poco.
Los pasos a seguir para proceder a la separación
son los siguientes:
1) Lavar las hojas de espinacas, retirar los nervios y ponerlas en un mortero, junto con el alcohol y una pequeña cantidad de
carbonato cálcico (que evita la degradación de los pigmentos fotosintéticos).
2) Triturar la mezcla hasta que las hojas se decoloren y el disolvente adquiera un color verde intenso.
3) Filtrar con un embudo y papel de filtro.
4) Colocar el filtrado en una placa
Petri, y sobre ella pon un
rectángulo
de
unos
15
centímetros de ancho por 10
centímetros de alto doblado en
V para que se mantenga en pie
sobre la placa de Petri.
5) Dejar así el montaje y esperar unas
horas. Los pigmentos se irán
separando según su adsorción.
Al observar el papel donde hemos
hecho la cromatografía, vemos
cuatro bandas o zonas (figura ),
que
corresponden
a
los
distintos
pigmentos
fotosintéticos presentes en las
hojas de espinaca. Según su
grado de solubilidad con el
alcohol se reconocen estas
bandas y en este orden:
clorofila b, clorofila a, xantofila,
carotenos
En el cromatograma así obtenido,
para proceder a la identificación
se compara la posición que
ocupan con la que tienen en
otras
con
mezclas
de
sustancias ya conocidas.
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