VALIDACION DE METODOS
ANALITICOS
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PRESENTACION DE INTEC-CHILE
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MEDICIONES ANALITICAS VALIDAS
• Las mediciones analíticas deben ser realizadas para
satisfacer requerimientos preestablecidos.
• Las mediciones analíticas deben ser realizadas utilizando
métodos y equipos que hayan sido verificados de tal manera
que aseguren que son adecuados a su propósito.
• El personal que realiza las mediciones analíticas debe
ser calificado y competente para asumir esta tarea.
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PRESENTACION DE INTEC-CHILE
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MEDICIONES ANALITICAS
VALIDAS
• En forma regular, debe existir una evaluación
independiente del desempeño técnico del laboratorio
• Las medidas analíticas realizadas en un laboratorio deben
ser consistentes con las que se realizan en otros
laboratorios.
• Las instituciones que realizan medidas analíticas deben
tener procedimientos de control y aseguramiento de
calidad bien definidos.
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ASPECTOS DE LA VALIDACION DE METODOS
• Especificaciones analíticas.
• Evaluación de su exactitud.
• Evaluación de su precisión (Repetibilidad y Reproducibilidad).
• Evaluación de incertidumbre.
• Sensibilidad.
• Especificidad
• Robustez.
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ASPECTOS DE LA VALIDACION DE METODOS
• Rango de concentraciones de trabajo y rango de
linealidad.
• Límite de detección.
• Límite de cuantificación.
• Ensayos de recuperación.
• Grado de validación necesario según objetivos.
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EVALUACION DE PRECISION Y EXACTITUD
DE UN METODO ANALITICO
ESPECIFICACIONES ANALÍTICAS:
Los límites aceptables de exactitud y precisión están
determinadas por los requerimientos de los resultados a
obtener a través de dicho método.
•LÍMITES LEGALES
•SISTEMAS DE ACREDITACIÓN
•USUARIO DE LAS MEDICIONES
•EXPERIENCIA PREVIA
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SELECCIÓN DEL MRC
• Nivel
• Matriz
• Cantidad
• Estabilidad
• Incertidumbre aceptable del MRC
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EXACTITUD DEL METODO
Esta propiedad se obtiene por comparación
del valor
promedio obtenido y el valor certificado , del MRC
Existen tres factores que contribuyen a la diferencia anterior:
•
El error (incertidumbre) del valor certificado.
•
El error de los resultados del proceso de medición que está siendo
evaluado, expresado como su desviación estándar d.
•
El error sistemático global que el laboratorio puede estar cometiendo.
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CRITERIO DE ACEPTACION DE
EXACTITUD
El criterio de aceptación de exactitud está dado por la siguiente
expresión:
LAB =  x -   < ( t0.05  sw / n ) + U =  crítico
Se acepta cuando LAB
<  crítico
Para realizar esta prueba estadística, es necesario tener alguna
información previa:
•
•
•
•
El valor de U, del MRC
Un valor estimado de la precisión del método.
¿Cual es la magnitud del sesgo que se quiere detectar?
¿Cual es el número “n” de mediciones replicadas que es necesario
realizar?
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PRESENTACION DE INTEC-CHILE
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CRITERIO DE ACEPTACION
DE EXACTITUD
Para ilustrar el uso del criterio anterior, veamos un ejemplo tomado de un
estudio de intercomparación (As) previo :
Un laboratorio participante realizó tres mediciones replicadas de un MRC
obteniendo un valor promedio de 40,2 g/L con una desviación estándar de
0.49 g/L.
El MRC tenía un valor certificado de 41,7 g/L y U= 0.5 g/L
Entonces lab = | 40,2 - 41,7 | = 1,5
crítico =(t0.05; df=2  SD /  n) + U = (4,303  0,49 /  3) + 0,5 = 1,72
En consecuencia “pasa” la prueba de sesgo
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PRESENTACION DE INTEC-CHILE
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CRITERIO DE ACEPTACION
DE EXACTITUD
Supongamos ahora que el mismo laboratorio realiza 9
determinaciones replicadas obteniendo el mismo valor
promedio, con una desviación estándar menor e igual a
0, 31 g/L.
El valor de lab es el mismo: 1,5
Ahora, crítico es = (2,306  0,31/  9) + 0,5 = 0,74
En consecuencia NO “pasa” la prueba de sesgo.
¿ QUE ES LO QUE OCURRE?
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PRESENTACION DE INTEC-CHILE
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CRITERIO DE ACEPTACION DE EXACTITUD
Lo que nos faltó es una pregunta previa muy
importante:
¿ Cual es la magnitud de sesgo que necesitamos
detectar, de acuerdo a lo que es requerido?
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PRESENTACION DE INTEC-CHILE
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CRITERIO DE ACEPTACION
DE EXACTITUD
Supongamos que por requerimiento regulatorio, o para
“aprobar” un requerimiento de desempeño por parte de un
organismo regulador es aceptable un sesgo máximo del 5%
relativo, en el rango de concentraciones 40 - 50 g/L.
El laboratorio sabe que su precisión al usar este método es
del orden del 2% relativo o Coeficiente de Variación.
Usamos la Tabla 1 (ver Informe). Con  y  = 0,05, para
d = d /  = 5% / 2% = 2,5  N = 3
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PRESENTACION DE INTEC-CHILE
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CRITERIO DE ACEPTACION
DE EXACTITUD
Si, en cambio, este laboratorio tuviera (típicamente) un
Coeficiente de Variación del 5% relativo, tendríamos
que para poder detectar un sesgo del 5%:
d = 5% / 5% = 1
y entonces de la Tabla 1 encontramos para
 y  = 0,05 que
N = 13
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PRESENTACION DE INTEC-CHILE
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FUENTES DE SESGO
 Control de las variables de medición
 Interferencias
 Calibraciones erróneas
 Contaminación
 Pérdidas
 Deterioro de las muestras
 Ineficiencias en las extracciones o disolución de las
muestras
 Blancos incorrectamente evaluados o no tomados en
cuenta.
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PRESENTACION DE INTEC-CHILE
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PRECISION DEL METODO
• Número de determinaciones replicadas
• Mediciones independientes
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PRESENTACION DE INTEC-CHILE
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EVALUACION DE LA PRECISION
• El control de la precisión del método implica la comparación
entre la precisión (desviación estándar intralaboratorio) bajo
condiciones de repetibilidad y el valor requerido de desviación
estándar.
• Realizar las “n” mediciones independientes (previamente
determinadas) sobre las muestras del MRC.
• Calcular, de la manera habitual el valor promedio y la
desviación estándar (sw ), bajo condiciones de repetibilidad.
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PRESENTACION DE INTEC-CHILE
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CALCULO DE LA PRECISION
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DONDE r ES LA PRECISION REQUERIDA




w
r
s 
 


2

A PARTIR DE UNA TABLA DE 2 OBTENER EL VALOR CRÍTICO 2TABLA PARA 95% DE
SIGNIFICACIÓN, PARA n-1 GRADOS DE LIBERTAD Y DIVIDIR POR
N - 1.
LA DECISIÓN ES:
a) SI 2 < 2TABLA NO HAY EVIDENCIA QUE EL PROCESO DE MEDICIÓN NO SEA TAN
PRECISO COMO ES REQUERIDO.
b) SI 2 > 2TABLA HAY EVIDENCIA DE QUE EL PROCESO DE MEDICIÓN NO ES TAN
PRECISO COMO ES REQUERIDO.
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PRESENTACION DE INTEC-CHILE
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OBTENCION DE d
• Utilizar la desviación estándar de reproducibilidad
obtenida en un ensayo interlaboratorios.
• Si este valor no está disponible, se puede utilizar la
reproducibilidad intra-laboratorio, obtenida de un gráfico
de control para el método en estudio
• También podría usarse el valor de precisión suministrado
por el certificado del MRC.
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PRESENTACION DE INTEC-CHILE
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EJEMPLO
.
Objetivo: Evaluar si cierto método analítico (método A)
es suficientemente preciso, utilizando un MRC de
hierro en minerales.
Información del certificado del MRC:

= 60.73% Fe
D
= 0.20% Fe
R (requerido) = 0.09% Fe
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PRESENTACION DE INTEC-CHILE
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E J E M PLO
S e realizaron 10 determinaciones Independientes de F e en el MR C , usando el
método A , con los siguientes resultados indiv iduales :
X i (% F e) = 60.7, 60.8, 60.8, 60.9, 60.9, 60.9,
x prom
= 60.930% fe
Sw
= 0.149% fe
2 
61.0, 61.0, 61.1, 61.2
 sw

 r



2
= (0.149/0.090)2 = 2.76
2tab l a p ara 9 g rado s d e libertad y 95% de c onfianza = 1.88
2 > 2tab la
Co nclus ión: la p recisión intralab oratorio del méto do A n o es tan b uena c o m o se
re qu ie re .
E l m éto do de be s er inv estig ado q uímicamen te .
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PRESENTACION DE INTEC-CHILE
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EJEMPLO
• Después de reexaminar el procedimiento se mejoraron las
condiciones del ataque ácido inicial y se repitió la
evaluación anterior. Ahora la precision del metodo “A
revisado” es tambien la requerida
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PRESENTACION DE INTEC-CHILE
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EVALUACION DE UN PROCESO DE MEDICION A TRAVES DE UN
PROGRAMA INTERLABORATORIO
• Establecer un número k de laboratorios participantes y el número n de
mediciones replicadas que se efectuarán sobre un MRC adecuado al propósito
del ensayo.
• Establecer los procedimientos técnicos y administrativos, por medio de los
cuales la institución organizadora, coordinará el programa.
• Evaluación de la precisión: la precisión del método se expresa en términos de
sw, que es la estimación de precisión intralaboratorio, y slm, que es la
estimación de precisión interlaboratorios.
• La precisión intralaboratorio se determina de la misma manera que la descrita
anteriormente.
• La precisión interlaboratorios puede ser determinada a través de un prueba
estadística:
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PRESENTACION DE INTEC-CHILE
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CONTROL ESTADISTICO
El siguiente concepto debe ser tomado como un axioma:
“El primer objetivo de un proceso de medición en el
laboratorio debe ser alcanzar su control estadístico”
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CONTROL ESTADISTICO
Donde Rprom es el promedio de un conjunto de, por lo menos, 15
medidas por duplicado.
LSP es el límite superior de precaución, igual a 2.512 Rprom
LSC es el límite superior de control igual a 3.267 Rprom
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PRESENTACION DE INTEC-CHILE
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