La proteína tiene un peso
molecular aproximado de:
• 32 kDa si tiene el péptido señal
de la proteína ompA
•29 kDa sin péptido señal.
1. Aumento gradual en la intensidad de la
banda de la proteína expresada dado que
cada mesa utilizó diferentes concentraciones
de inductor.
2. La concentración de proteína expresada
será mayor conforme aumenta el tiempo
trascurrido después de la inducción con el
IPTG.
3. Las bandas pertenecientes a las proteínas
de las células también se verán más intensas
debido al crecimiento celular, sin embargo no
serán tan intensas como la de la proteína
inducida.
Tiempo de inducción 0
0.5 1.0 1.5
Std
Teñido con la solución de Coomasie
0.12% azul de coomasie R250
50% Metanol
10% ácido acético
Desteñido con:
45% Metanol
10% ácido acético
Equipo 1 y 2
Equipo 3 y 4
Equipo 5 y 6
Equipo 7
A pesar de que se utilizaron 3 concentraciones
distintas de inductor las bandas señaladas con
la flecha aparentan tener la misma intensidad lo
que indicaría que se obtuvieron cantidades
iguales de proteína inducida.
Se obtuvo, de acuerdo con el
estándar, la proteína en un peso
molecular cercano al esperado.
Pásmido
+ inserto1
Pásmido
+ inserto2
Marcador
de PM
Plásmido
Inserto 1
Inserto 2
Recordando…
6
Estándar de peso molecular
Gel de
muestra
1 Std
2 Sin restringir
3 BamHI
4 BamHI+NdeI
5 NdeI(30 min)+
BamHI (OVN)
6 NdeI (OVN)
OVN toda la noche
1
2
3
4
5
6
Topoisomero
alto peso
molecular
Vector
recombinante
linearizado
Vector vacío
Banda inserto
RNA y/o
proteínas de
bajo peso
Resultados
1
1. Plasmido sin
restringir
 2. restringido
con una enzima
 3. restringido
con las dos
enzimas
 4. estándar
2
3 4

Plásmido
sin
restringir
ADN
restringido
con una
enzima
Bandas
esperadas
RNA y/o
proteínas
de bajo
peso
Descargar

Resultados Inducción y Restricción