Para determinar las características concretas
de especies de microorganismos, es
indispensable aislarlos como un cultivo
puro.
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MORFOLOGIA COLONIAL
MICOLOGÍA
(HONGOS)
Dimórficos:
Se presentan como moho a 250C y
como levadura a 370C (patógeno)
Formas o métodos de identificación en hongos
MICROCULTIVO Y COLOREAR CON AZUL DE LACTOFENOL
1.- Aspecto macroscópico de la colonia en agar sabouaud o papa
dextrosa.
2.- Tipo de hifa.
3.- Colocación del o los esporóforos.
4.- Presencia de esterigmatas (esporangióforo o conidióforo)y el orden
que presentan.
5.- Forma tamaño y distribución de las esporas.
6.- Presencia o no de rhizoides. Solo se presentan en hongos de hifa
no septada.
Por ejemplo: Rihizopus, Rhizomucor, Absidia
7.- Practicar pruebas de identificación bioquímica.
Aspergillus
Penicillium
Fusarium
Curvularia
• Microcultivo en portaobjeto mostrando la inoculación del
tapón de agar (flecha)
PARASITOLOGÍA
unicelulares
Endolimax
Naegleria
(I)
Giardia
Toxoplasma
(II)
Fasciola hepatica
Trypanosoma
(III)
Paramecium
Balantidium
(IV)
pluricelulares
Ascaris
T. solium
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Método de Flotación (Faust):
Procedimiento:
Se toma el otro tubo del paso III inciso 2, centrifugado anteriormente
Se agregan 1.0ml. de solución de sulfato de zinc al sedimento y mezclar agitando
el tubo o bien con un aplicador.
Se llena el tubo con más solución de sulfato de zinc hasta de 2 cm. del borde.
Se pasa la suspensión por la gasa que se ha puesto sobre el vaso de papel, se
desecha la gasa.
Se regresa la suspensión al tubo y se agregar suficiente sulfato de zinc para llenar
el tubo hasta 2 cm. del borde.
Nota: Si la suspensión está clara, se puede omitir el paso anterior.
Centrifugar un minuto a 2000 rpm. Dejando que la centrífuga pare
espontáneamente.
Se prepara un portaobjeto poniendo una gota de lugol.
Sin quitar el tubo de la centrifuga, y usando el asa estéril, tomar varias cargas de
la película sobrenadante, emulsionándola con el lugol.
Cubrir con el cubreobjetos y observar al microscopio.
Exudado faríngeo:
•
se toma un hisopo estéril.
•
Se procede a tomar la muestra del fondo de la garganta.
•
Se inclina la cabeza del paciente hacia atrás y se ilumina bien la cavidad orofaríngea. Figura:
11.
•
Se solicita al paciente que abra bien la boca y emita un “AH”.
•
La lengua se baja suavemente con una espátula desechable.
•
Se introduce el hisopo hasta donde se encuentran las amígdalas y se frota contra la parte
posterior de la mucosa faringea de un lado al otro hasta la otra amígdala o cualquier mancha
blanca o ulceración que se encuentre en esa zona. Evite tocar la lengua, la zona periodontal y
la mucosa de los carrillos. Figura
•
Proceda a realizar la siembra en los medios de cultivo a utilizar descargando el hisopo en una
esquina de la placa y desecharlo en un recipiente con desinfectante y proseguir sembrando
por estría cruzada con el asa para lograr el aislamiento del cultivo puro.
•
Incubar de 35-37 grados centígrados y de 18-24 horas, en aerobiosis o anaerobiosis según
sea necesario.
•
Después de este tiempo realice las observaciones macroscópicas y microscópicas.
•
Proceda a realizar las pruebas bioquímicas correspondientes, descritas posteriormente para
cada tipo de microorganismo.
Diferenciación de especies
La diferenciación de especies de este género
es complicada debido que se utilizan los tres
sistemas
diferentes
mencionados
a
continuación:
1. Propiedades
serológicas:
Grupos
de
Lancefield. serogrupos A hasta H y K hasta V.
2. Patrones hemolíticos: alfa, beta y gama
hemólisis.
3. Propiedades bioquímicas (fisiológicas).
REBECA
LANCEFIELD
desarrollo en 1933 el sistema de
clasificación
serológica
para
diferenciar las cepas
Betahemolíticas .
Los antígenos detectados son
polisacaridos de pared celular
como en los estreptococos:
grupos A, B, C, F y G.
Estos antígenos se pueden
detectar fácilmente con pruebas
inmunológicas, y han sido útiles
para la identificación rápida de
algunos patógenos.
Por ejemplo: Streptococcus pyogenes (clasificado como
streptococcus del grupo A)
El antígeno de grupo se puede detectar por
inmunoanálisis rápido.
Streptococcus de importancia Médica
Descripción colonial
• Las cepas más virulentas poseen cápsula de
ácido hialurónico (ácido glucurónico y Nacetilglucosamida). De aspecto mucoide en
medios recién preparados y rugosa (mate) en
medios secos.
• Las cepas no capsuladas, son pequeñas y
brillantes.
• Normalmente
de
color
gris-blanquecino.
Brillantes.
• > 0.5 mm.
• < 0.5 (pinpoint)
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