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EL MICROTOMO
 INTRODUCCIÓN
 COMPONENTES DE UN MICROTOMO
 PRINCIPIO BÁSICO DE FUNCIONAMIENTO.DEL




MICROTOMO
TIPOS DE MICROTOMOS.
TÉCNICA DE CORTE EN MICROTOMO DE
ROTACIÓN.
ELCORTE POR CONGELACIÓN
TÉCNICA DE CORTE PARA MATERIAL INCLUIDO
EN CELOIDINA
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EL MICROTOMO
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EL MICROTOMO
El microtomo (o micrótomo) es un
aparato mecánico que permite la
obtención de secciones de tejido de
espesor micrométrico que pueden
ser empleadas posteriormente para
su estudio al microscopio. A menor
grosor mejor estudio.
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EL MICROTOMO
Los microtomos poseen cuchillas de
metal y mecanismos para regular el
grosor de los cortes y el avance de la
muestra que se coloca en él. Se utilizan
para estudiar secciones de tejidos
potencialmente patológicos de los que
se pretende obtener un diagnóstico.
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EL MICROTOMO
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EL MICROTOMO
Los componentes fundamentales de un microtomo son:
 Porta bloques: en el que apoyamos el casete con la muestra.
 Porta cuchillas: consiste en un dispositivo de fijación
basado en una pinza que sujeta y orienta adecuadamente la
cuchilla.
 Mecanismo de avance del porta bloques sobre la cuchilla:
sistema mecánico o electrónico que proporciona cortes
sucesivos.
 Base.
 Caja
 Manivela: está situada a la derecha del aparato; consiste en
un volante con una manilla y un freno.
 Freno: es un tornillo que, accionándolo hacia afuera y/o
girándolo sobre sí mismo un cuarto de vuelta, libera la
manivela.
 Manivela de recuperación
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EL MICROTOMO
Existen 4 tipos:
 1. Bicóncava por ambas caras:
 2. Plano-cóncavas: También se llaman de
tipo A y B según sea mayor o menor el frado
de concavidad de la cara no aplanada.
 3. Cuchilla biplana en cuña: o de tipo C
 4. Biplana: O de tipo D.
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EL MICROTOMO
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EL MICROTOMO
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EL MICROTOMO
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EL MICROTOMO
 Tiene un porta bloques en el que se va a apoyar el
material que se va a cortar que avanza sobre una
cuchilla gracias a un sistema de cremallera de forma
periódica se hace incidir el bloque con la cuchilla o
viceversa que va sobre el porta cuchillas con lo que
obtendremos secciones titulares de espesor
equivalente al seleccionado por el tornillo que controla
el mecanismo de avance.
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EL MICROTOMO
 El mecanismo de avance puede ser manual o
digitalizado. Nuestro bloque está formado por
parafina. Antiguamente la fijación del bloque era con
parafinas fundida. Actualmente se realiza por medio
de una pinza y es encima de éste porta bloques donde
existen unos tornillos que los permiten orientar el
bloque de manera que queda paralela a la cuchilla
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EL MICROTOMO
 Porta cuchillas consta de dos palancas que nos
permiten fijar la cuchilla al micrótomo. Estos impiden
que la cuchilla quede suelta y hay una palanca que
controla la inclinación de la cuchilla para cortar de
forma homogénea el bloque. El sistema de avance
mecánico del porta bloques sobre la cuchilla
proporcionará cortes sucesivos de tejido a partir del
bloque
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EL MICROTOMO
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EL MICROTOMO
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EL MICROTOMO
OSCILACIÓN O BALANCEO
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EL MICROTOMO
Es el más simple de todos los micrótomos; el bloque
del tejido se monta en el extremo de un brazo móvil de
resorte y la cuchilla se mantiene rígida en posición
horizontal con el filo hacia arriba y ligeramente
inclinada hacia el bloque.
Este micrótomo se usa ampliamente en el Reino Unido
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ROTACIÓN
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EL MICROTOMO
DESLIZAMIENTO
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EL MICROTOMO
DE CONGELACIÓN
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EL MICROTOMO
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CRIOSTOMO
O
CRIOSTATOS
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EL MICROTOMO
ULTRAMICROTOMO
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EL MICROTOMO
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La confección de los cortes consta de 6 pasos.
Si no trabajamos el freno ha de estar puesto
No se coge la cuchilla con las manos, cuando no se
utiliza la cuchilla se pone una pieza que se llama
guardas.
Antes de empezar a cortar hay que tener preparado el
material. Hay que preparar placas de parafina frías con
hielo para mantener fríos los bloques, prepararemos
portas, lápices de grafito, agujas histológicas…
Se enchufara el baño de flotación programando la
temperatura entre 45-50 grados. Se debe comprobar
periódicamente esta temperatura, con el termómetro.
Se añadirá al baño una pequeña cantidad de gelatina en
polvo, o bien que los cortes se adhieran al portaobjetos
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EL MICROTOMO
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TALLADO DEL BLOQUE
Retallar un bloque es eliminar el exceso de medio de
inclusión que existe en su periferia
Después el bloque debe enfriarse para conseguir una
consistencia óptima de la parafina
El exceso de parafina que rodea la pieza se quita
mediante cortes sucesivos con la cuchilla de bisturí, de
manera que nos quede un prisma
A la superficie a cortar se le debe dar forma de trapecio
rectangular
El bloque de parafina en el momento de realizar los
cortes debe encontrarse a una temperatura de entre 5°
y 10°C
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EL MICROTOMO
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EL MICROTOMO
FIJACIÓN Y ORIENTACIÓN DEL BLOQUE.
El bloque se coloca en la pinza portabloques
de manera que la parte más blanda de la
pieza sea la primera en tomar contacto con
la cuchilla, haciendo ésto evitamos que el
corte sea arrollado por la cuchilla. La
orientación se consigue mediante un
sistema de rótula. La superficie del bloque y
la cara interna de la cuchilla deben estar en
exacto paralelismo
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EL MICROTOMO
ORIENTACIÓN DE LA CUCHILLA.
Hay que saber que existen 4 ángulos de control de la
incidencia del bloque sobre la cuchilla:
 1º es el ángulo de inclinación, se representa por I, debe
ser de 10-15 grados
 2º es el ángulo de arrastre, se representa por A, debe ser
entre 5 y 8 grados
 3º es el ángulo de corte, se representa por C, debe ser de
60 grados
 4º es el de ángulo libre, es el complementario al ángulo
de corte.
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ORIENTACIÓN DE LA CUCHILLA
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EL MICROTOMO
DESBASTADO DEL BLOQUE
Consiste en retirar, mediante cortes gruesos,
la parafina de la superficie del bloque que
nos cubre el tejido. El desbastado termina
cuando se obtiene en cada corte la superficie
completa del tejido.
Pueden ser:
Manual.
Mecánico
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EL MICROTOMO





TÉCNICA DE CORTE.
Con el tornillo micrométrico ajustamos el grosor
adecuado de corte (entre 4 y 6 micras).
La resistencia que ofrecen al filo de la cuchilla la
parafina y el tejido han de ser lo más uniformes
Deben salir cortes de tejido seriados y paralelos
Hay que vigilar que la consistencia de la parafina y el
tejido sean similares
Los cortes se recogen con ayuda de un pincel y se
llevan al baño de flotación
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EL MICROTOMO
BAÑO DE FLOTACIÓN
Que estarán llenos a 2/3
de su capacidad y a una
temperatura de 45°C.
Se dejan en el baño
durante un tiempo (30"
a 2')
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TÉCNICA DE CORTE
 A continuación se realiza la pesca de los cortes, para lo
que utilizamos portas limpias impregnadas de un
agente adhesivo (Albúmina de Mayer). Se sumergen los
portas verticalmente en el baño de agua
 Es necesario marcar los cortes escribiendo en los portas
con un lápiz con punta de diamante o normal si el porta
tiene una parte esmerilada.
 Posteriormente dejar escurrir colocándolos de forma
inclinada durante unos 2 a 5 minutos
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EL MICROTOMO
SECADO DE LAS PREPARACIONES
HISTOLÓGICAS Y ALMACENA-MIENTO DE LOS
BLOQUES.
La desecación e puede realizar de distintas formas.
 La desecación puede hacerse de esta forma rápida
introduciéndose los portas en un cestillo y este en una
estufa que se encuentra previamente a 60 grados
durante 30-35 minutos.
 También se puede dejar hasta 37 grados hasta el día
siguiente
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EL MICROTOMO
SECADO DE LAS PREPARACIONES
 Una vez obtenidos los cortes, la superficie del
bloque debe taparse con parafina derretida para
evitar la entrada de agua, desecación o lesiones de
otro tipo en el tejido, tras lo cual procederemos al
almacenamiento de los mismos.
 Al acabar los cortes se desmontará el soporte de la
cuchilla y la cuchilla, limpiando ésta con xilol y
pasando un pincel grueso por el resto del aparato
hasta quitar todos los restos de parafina
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EL MICROTOMO
SECADO DE LAS PREPARACIONES
 El porta debe estar bien desengrasado, para
ello después de lavarlo con agua y jabón y
enjuagarlo con agua destilada se pueden
dejar en una solución de alcohol clorhídrico
formado por 1 mL de HCl en 1000 mL de
alcohol etílico de 96 o bien dejarlo en alcohol
éter a partes iguales durante un día. Se deja
secar y se coge por los bordes (Se deja secar
inclinados).
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EL MICROTOMO
SECADO DE LAS PREPARACIONES
 Para técnicas histoquímicas inmunológicas o de
biología molecular se necesita impregnar los portas
con sustancias adhesivas que eviten que se
desprendan los cortes, para ello se utilizan
sustancias naturales como la albúmina de huevo o
gelatina o bien sistemas comerciales que son más
caros pero proporcionan mayor adhesividad.
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EL MICROTOMO
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1 -- Medula ósea en lÍquido Bouin
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2 -- CONTROL DEL GRADO DE
DESCALCIFICACIÓN
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3 -- Control del grado de
decalcificación
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4 -- Inclusión en caset de plástico
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5 -- Corte en micrótomo tipo Minot
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6 -- Recogida de los cortes en un
baño de agua a 45ºC.
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7 -- Técnica Giemsa
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GRACIASSSSSS
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