Lab: Serología Hospital Severo
Ochoa
CONCEPCION BELLIDO MARTIN
2º LDC
Técnicas de diagnóstico serológico

AGLUTINACIÓN----

ELISA------------------- E.de Chagas Tripanosomas cruzi




RPR--reagina plasmatica rapida
BRUCELLA-- Rosa de. Bengala
INMUNOFLORESCENCIA—LEISMANIA-- Leismaniosis
BORDETELA PERTUSI -- tosferina
PARVOVIRUS B 19-- detección ac IgG,IgM
INMUNOGROMATOGRAFÍA—VIRUS de Epstein Baar (Mononuclosis infecciosa)
HP( Helicobaster Pyroli)
HEMAGLUTINACIÓN---PTHA--prueba de aglutinación de Treponema palldun
QH-----quiste hidatilico
WESTEM BLOT---VIH confirmación
CENTAURO,este aparato hace difirentes tecnicas:ac y ag de VHB,C,D,VHA Mononucleosis,
Rubeola,Toxoplasmosis y Cargas Virales.

RPR Reagina plasmatica rapida
Tecnica para la detección cualitativa y semicuantitativa
de anticuerpos de la sífilis en suero o plasma humano
por aglutinación.
NEGATIVO
La RPR es una prueba no treponemica por que los an
ticuerpos que detecta no son especificos del T pallidum,
aunque la presencia de los anticuerpos que detecta en
el suero o plasma esta fuertemente asociada con la in
fección de ese organismo.
Este tipo de prueba mide ac(IgG y IgM) producidos
como respuestaal material lipoideo liberado de células
anfitrionas dañadas,asi como material tipo lipoproteina
liberado por las espiroquetas.
La tecnica usa partículas de carbono recubiertas con
una mezcla de aníigenos lipídos que se combinan con
el anticuerpo presente en el suero o plasma las partícu
las se suspenden en un medio que contiene componen
tes para eliminar reacciones no específicas.Las reac
cíones positivas se muestran mediante el agregado
macroscópico de las partículas.
POSITIVO
ELISA T.Inmunoensayo enzimático E.
de Chagas
Test de ELISA para la detección de anticuerpos contra
Trypanosoma cruzi en suero o plasma.
Enfermedad cronica parasitaria tambien puede ser con
genita o por transfusión de sangre o trasplantes de orga
nos. .
Metodo inmunoenzimatico en el que se recubren pocillos
de una placa de microtitulación con antigenos de T. cruzi
a los pocillos se les añade las muestras a analizar si en esta hay anticuerpos especificos frente aT.cruzi se formara
un complejo estable con el antígeno que recubre el pocillo
despues se lava y extrae el material no unido se añaden
IgG de conejo anti-IgGy anti-IgM humanas marcadas con
perosidasa y, si el complejo An/Ag enzimatico y cromóge
no. Esta solución desarrollara un color azul si la muestra
es positiva,este cambia a amarillo despues de parar la rea
ción con acido sulfúrico.La intensidad del color es propor
cional a la concentración de anticuerpos anti-T.cruzi los po
cillos que contengan muestras negativas no desarrollaran
color.
Tecnica de inmunofluorescencia
Las leishmaniosis son un grupo de enfermedades
parasitarías provocada por un protozoo flajelado
perteneciente al género Leishmania
Para hacer esta técnica hay que atemperar los los
reactivos y marcar los portas,
Las inmunoglobulinas séricas humanas antileishmania
Infantun presentesen la muestra se fijan a los
parásitos
depositados sobre los portas, los elementos no fijados
son eliminados con los lavados.
Las inmunoglobulinas se revelan por las
inmunoglobuli
nas de cabra anti-inmunoglobulina humanas
marcadas
con fluorescencia.Los elementos no fijados son
elimina
dos con los lavados
La lectura de resultados se hace con un microscopio
de
epifluorescencia.
Tecnica de inmunocromatocrafia
Mononucleosis infecciosa
La mononucleosis infecciosa enfermedad autolimitante
causada por el virus de Epstein Barr,aparece más fre
cuentemente en paises desarrollados entre adoescen
tes de los 14 a los 18 años.
.
Esta técnica detecta los anticuerpos IgM en suero y plas
ma o sangre entera, en esta técnica se utiliza un extracto
de eritrocitos de bovino.En el pocillo de muestra hay una
membrana cubierta con microesferas de latex conjugadas
a anti-cuerpos de cabra anti-IgM en la segunda fase (ven
tana de resultados)hay dos agentes inmovilizados las es
feras de latex y los eritrocitos de bovino, en la tercera fa
se hay un agente capaz de unirse al complejo de anticuer
pos -latex .
se pone la muestra en el pocillo se añade el rebelador el
liquido pasa por capilaridad se une al anticuerpo -latex y
se desplaza hasta la zona con los eritrocitos de bovino Ag
inmobilizado si los anticuerpos anti-MI estan presentes en
la muestra se forma un sandwich de fase solida /anticuer
po anti-MI/anticuerpo latex esto hace que aparecan dos li
neas verticales si el resultado es positivo y una linea si el
resultado es negativo.
Tecnica de Biología Molecular
B. MOLECULAR---DNA--- VHB
RNA---VHC genotipo
RNA—VIH
PCR --T.real RNA

En mi rotación por el departamento de serología
me comentaron que se hacian las técnicas antes
expuestas pero no tuve la oportunidad de ver nin
guna por eso no las expongo.
VHB
PTHA -T. de hemaglutinación
Test de hemaglutinación pasiva para la detección
de anticuerpos especificos anti-Treponema palli
dum en suero o plasma humano.
NEGATIVOS
Los hematies de pollo estabilizados se sensibili
zan con un extracto antigénico de Treponema pa
llidun (cepa Nichols). Estos hematies aglutinarán
con los anticuerpos específicos presentes en el
suero o plasma de pacientes afectados por sífilis. POSITIVO
Las reacciones no especifícas se detectan con el
reactivo control no sensibilizado.
Los anticuerpos del grupo Treponema no especiíi
cos no especificos de la sífilis se absorben con un
extracto de Treponema Reiter.
POSITIVO
Westerm Blot
Los virus de la inmunodeficiencia humana tipo 1 y tipo 2 (VIH-l y VIH-2) han sido
claramente identificados como la causa principal del sindrome de inmunodeficiencia
adquirida (SIDA).
La técnica "western blot" , es una de las más ampliamente utilizadas para confirmar
resultados positivos en las pruebas de depistaje de Ac VIH, ya que permite una
discriminación puntual de las especificidades de reactividad de anticuerpos frente a
las distintas proteínas del virus.
Las tiras de nitrocelulosa en las que se han transferido las proteínas del virus
contienen, generalmente, casi todas las proteínas estructurales del VIH, algunas
proteinas precursoras de aquellas, y además otros antígenos celulares
contaminantes que proceden de las células infectadas empleadas para la obtención
del Ag vírico . Algunas tiras de WB comercializadas para VIH- 1 incluyen, además,
algún péptido sintético, correspondiente a glicoproteínas específicas de VIH-2, a
efectos de identificación de la infección VIH con una sola tira de reactivo.
La técnica de WB consiste, básicamente, en la incubación de una de esas tiras con el
suero problema durante un tiempo que oscila entre 2 a 4 horas hasta 18 horas, tras lo
cual se revela la presencia de anticuerpos frente a las diferentes proteinas del virus
mediante reacciones inmunoenzimáticas de distinta configuración dependiendo del
fabricante. El resultado es la aparición de bandas coloreadas de mayor o menor
intensidad, en el lugar de la tira de nitrocelulosa en el que están situadas las proteinas
del VIH contra las cuales existen anticuerpos en el suero problema.
Centauro
Este aparato,llamado Centauro 2000 es el encar
gado de hacer muchas de las técnicas que se
hacen en la sección de serología lo unico que ne
cesita es un Tecnico especialista de laboratorio que
le programe todos los dias y atienda sus necesi
dades de H2O, calibradores, cubetas,puntas y con
troles, ya, comienza a trabajar haciendo técnicas
como: Rubeola, toxoplasmosis,VIH, agVIHs,acVHB
VHC,Core, Delta,
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