PRUEBAS CONFIRMATORIAS
POR :
LIC. RICARDO SALDAÑA





PRUEBAS DE ELISA:
Primera Generación: Los
antígenos utilizados provienen del
lisado viral de un cultivo
Segunda Generación: Los
antígenos corresponden a proteínas
recombinantes o Péptidos sintéticos.
Tercera Generación: Péptidos
recombinantes sintéticos de VIH-1, 2,
0.
Cuarta Generación: Se adicionó el
p24.
Por: Lic. Ricardo Saldaña
2


CONTINUACIÓN…
Pruebas de confirmación: Tienen alta
especificidad
Western Blot
 Inmunofluorescencia Indirecta.
 Radioinmunoprecipitación


PUEDEN SER UTILIZADAS PARA DISMINUIR LA
POSIBILIDAD DE OBTENER RESULTADOS FALSO
POSITIVO.
3
Por: Lic. Ricardo Saldaña

•
•
•
•
•
•
•
•
•
WESTERN BLOT
Prueba de confirmación
Principio: Ensayo
inmunoenzimático
Detecta anticuerpos
contra proteínas
específicas del VIH 1
Interpretación: visual
Muestras: suero y
plasma
Volumen: 20 µl
Tiempo: 3.5 hrs
Sensibilidad: 100%
Especificidad: 100%
Por: Lic. Ricardo Saldaña
4

Nomenclatura de las bandas en Western Blot
Denominación CDC
gp160
gp160
gag Precursora del core
Precursora del core
Proteína principal
Proteína de la matriz
p55
p40
p24
p17
pol Transcriptasa inversa
Transcriptasa inversa
Endonucleasa
p66
p51
p32
gp120
gp41
OMS
Al menos 2
bandas
Por: Lic. Ricardo Saldaña
Gen Proteína
env Precursora de la
envoltura
Glucoproteína externa
Glucoproteíina
transmembrana
gp120
p24
5

DIAGNOSTICO DE CASOS DE
VIH POSITIVOS
2

Prueba Rápida + ELISA

ELISA + Prueba Rápida

ELISA + ELISA

Prueba Rápida + Prueba Rápida
Recomendación en: Protocolo Nacional para el Tratamiento
Antirretroviral del VIH-SIDA.
Recomendación: OMS
Por: Lic. Ricardo Saldaña
pruebas de tamizaje: diferente
principio inmunológico con resultados
iguales.
6
TAMIZAJE SEROLÓGICO PARA HIV
UTILIZANDO DOS TESTS
T AM IZ AJ E S E R O L Ó G IC O P O R AN T I-H IV
E L IS A 1 + E L IS A 2
E L IS A 1 : R
E L IS A 1 : R
E L IS A 2 : R
E L IS A 2 : N R
E L IS A 2 : N R
E L IS A 1 : N R
E L IS A 1 : R
E L IS A 2 : N R
R E P E T IC IÓ N D E L O S T E S T S E N D U P L IC AT A
E L IS A 1 : R
E L IS A 1 : R
E L IS A 2 : R
E L IS A 2 : N R
D E S C AR T AR L A B O L S A
E L IS A 1 : N R
E L IS A 1 : N R
E L IS A 2 : R
E L IS A 2 : N R
L IB E R AR L A
BOLSA
L L AM AR AL D O N AN T E
ALGORITMO PARA DIAGNÓSTICO DE INFECCIÓN POR HIV
Anti-HIV
1ª MUESTRA
2ª MUESTRA
REACTIVO
IND
NEGATIVO
IND
NEGATIVO
Repetir en duplicata
REACTIVO
WB
POSITIVO
IND
NEGATIVO
1ª
2ª
PCR
COLECTAR
NUEVA
MUESTRA
HIV – VENTANA INMUNOLÓGICA
H IV R N A p la s m a
A n ti-H IV
Ag p24
IN F E C C IÓ N
T E Ó R IC A
0
11
16
22
D ia s
A n ti-H IV : 2 2 d ia s
VENTANA
IN M U N O L Ó G IC A
H IV p 2 4 : 1 6 d ia s
H IV R N A : 1 1 d ia s
MUCHAS
GRACIAS
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